龙须菜配子体SSH文库的建立及与性别相关基因的分析.pdfVIP

龙须菜配子体SSH文库的建立及与性别相关基因的分析.pdf

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料 础 体 异表达基因。正反向SSH文库中各选取384个克隆进行斑点杂交筛选。结果中 我们得到了一条在雌配子体中特异表达的基因(暂命名为GMF-01)序列标签。 长。测序结果分析表明这一基因的eDNA开放阅读框全长1002bp,GC含量为 47.7%,编码由333个氨基酸组成的多肽链。在NCBI网站上对这一序列进行比 对,结果显示这一序列与已知的序列没有同源性。氨基酸序列分析表明这一序列 演绎的蛋白等电点为7.92,蛋白质不稳定系数为43.61,可认为是不稳定蛋白。 二级结构预测表明无规卷曲占45.05%,植物亚细胞定位分析结果显示这很可能 是一种胞外分泌蛋白。它的功能和结构还有待进一步的研究和验证。 本研究建立的抑制性消减杂交文库为更多差异基因的鉴定打下了基础,研究 中获得的差异表达基因是与龙须菜配子发生过程密切相关的基因,研究这些基因 的功能对江蓠属海藻性别决定机制的的认识具有重要意义,并会为红藻进化研究 提供参考资料。 关键词:龙须菜抑制性消减杂交性别决定配子体 SUPPRESSIONSUBTRACTIVE LIBRARIESCONSTRUCTl0NBETWEEN GAMETOPHYTESOFGRAcILARIA SEX.RELATEDGENES ANALYSISOF ABSTRACT Gracilaria not an lemaneiformisonlyeconomicallyimportantagarophyte,but alsoa materialfor studies.G nowthethird good geneticM lemaneifo脚西is algal cultivationin is to basicstudiesonG industryChina.Thus,it importantpursue lemaneiformis. Inthis isolate between and study,togenesdifferentiallyexpressed phases 0forwardandreverse subtractive gametophytes,1 suppression librarieswere between matureand constructedgametophytes(both ofG were toscreen384colonies tetrasporophyteslemaneifo腑西.Dot-blotsperformed selectedfromeachsubtractedlibraries.Partial randomly gene(namedGMF-01 whichisfemale wasselectedtoisolateits temporarily)sequencegametophyte—specific cDNAfull we itscDNAfull got lengthsequencesusing lengthsequences.Then SMART-RACE showsthatthe analysis openreadingframe(ORF)

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