中药成分受体介导的肝胞内靶向给药系统的研究.pdfVIP

中药成分受体介导的肝胞内靶向给药系统的研究 导 师 侯世祥教授 博士研究生 毛声俊 摘要 肝炎、肝癌等肝脏疾病是当前需要重点研究的极大地危害人类健康的重 大防治疾病之一，其病变多发生于肝细胞。然而，现有药物进入肝细胞的能 力差，治疗效果不甚理想。因此将药物靶向给药于肝细胞内更具有实际意义。 本文选择国内尚处于空自、国际上剐开始起步研究的中药成分受体介导的 肝细胞内靶向给药系统为课题方向，分别以生物降解性牛血清白蛋白和混合类 荧光物质钙黄绿素为模型药物，制各甘草酸表面修饰万乃洛韦白蛋白纳米粒 (、rACV-BSA加—GL)、甘草酸表面修饰钙黄绿素白蛋白纳米粒 药纳米粒。对其制备工艺、药剂学特性、体外释药规律、初步稳定性、体外细 胞摄取、体内分布规律与药代动力学进行了系统的研究，探讨和评价中药成分 受体介导肝细胞内靶向给药的可行性。 采用高碘酸钠氧化法结合去溶剂化．交联法制各得到甘草酸表面修饰自蛋 因素法优化了ⅥLCV-BSA姗．GL的制备工艺，测定其表面甘草酸密度为9．3 个甘草酸分子／白蛋白分子，包封率为64．10％，载药量为1．28％。激光散射法 测定其平均粒径为268 nnl。透射电镜观察纳米粒形态圆整，大小较均匀，基 本无粘连。体外释药规律可用双指数双相动力学方程描述。初步稳定性研究 及表面甘草酸密度无明显变化。对CaI-BSA．NP．GL的制各工艺及药剂学特性进 国际上首次成功将甘草酸与固态纳米粒表面氨基偶联，并建立相应的验证方 l 法，因此本部分研究在制备工艺与评价方法上具有明显的创新性。 在合成导向分子30．硬脂酰甘草次酸．3．琥珀酸酯(Suc．GAOSt)的基础上， 建立了该新化合物的HPLC定量方法。采用乙醇注入法制备得到甘草次酸表 面修饰脂质体(LP．GA)。并建立凝胶柱色谱一耻Lc法对其进行了验证。透射 电镜观察LP．GA的形态以圆形为主。进而制备得到Cal．LP．GA，测定其载药 量为1．37t』g／mg混合类脂。激光散射法测定其平均粒径为62rim。由于在国际 上首次合成Suc．GAOSt，并建立其定量方法，证实其可以较高比例掺入LP 中，首次成功制备甘草次酸表面修饰纳米粒。因此本部分研究设计思路新颖、 验证与评价方法先进合理．创新性强。 采用体外大鼠肝细胞原代培养技术，以HPLC法和荧光分光光度法为定 量手段，对肝细胞摄取三种表面修饰载药纳米粒的规律进行了研究。结果显 示，摄取量增加表现为剂量依赖性，且存在饱和剂量。摄取量的经时变化符 载药纳米粒的肝细胞摄取量分别是各自对照组的3．32、3．69和2．4l倍。加入 配体甘草酸或甘草次酸后，肝细胞对修饰纳米粒的摄取量受到不同程度的抑 制，而普通纳米粒的摄取量则无明显变化。结果表明，纳米粒经中药成分配 体甘草酸和甘草次酸表面修饰后，可通过其位于肝细胞膜表面的受体介导的 内吞入胞作用明显增加肝细胞摄取量，达到了课题设计的预期目的。 在动物体内靶向性研究中，采用HPLc法测定静注15rain后， 封闭受体组在小鼠肝脏的相对分布量分别为69．890，64．82％与65．20％。统计学 检验结果表明，修饰组与对照组制剂的肝脏药物相对分布量具有显著差异 (PO．10)，而预先用GL封闭受体后，修饰组的主动靶向摄取受到抑制，结果 动靶肝性。 本课题在国际上首次成功制备BSA．NP．GL、LP．GA二种中药成分受体介 导的肝胞内靶向给药系统，并为该给药系统的表面修饰验证与定量，建立了 合理、客观的评价方法，进而研究了其体外肝细胞摄取特性与体内肝脏分布 2 规律，证实了由中药成分受体介导肝细胞内靶向给药具有一定的可行性。以 上研究内容国内外均未见报道。通过这些研究，为探讨中药成分受体介导的 肝胞内靶向给药的方法、规律、靶肝特性与靶肝机理奠定了理论与实践基础。 同时，该研究丰富了受体介导的细胞内给药的研究内容，而且将为探讨和总 结受体介导的肝胞内靶向给药提供有较高学术价值的参考和借鉴，为设计和 研制新型受体介导的靶向给药系统提供了新思路。 关键词：肝胞内靶向给药系统 甘草酸 甘草次酸