转化生长因子β1表达与矽肺肺纤维化关系的研究.pdf

珍中澎 丈笋闻跻曹笋 娜士笋世igl丈 结果小鼠AM经不同剂量石英刺激4h后，结果显示随着石英剂量增加细胞培养上 清TGF-(i1蛋白水平逐渐升高，剂量100u留10细‘胞时，与空白对照组比较差异有显著性 (P0.05).同剂量的石英作用不同时间后，TGF-肠蛋白随时间延长呈现先升高而后逐 渐降低的趋势，染石英8h时，其水平最高((276.6士38.lpg/ml),然后开始下降，但到第 16h仍高于对照组.AM内TGF-01蛋白的表达有随石英剂f增高而上升的趋势，且随作 用时间延长也呈先升高后降低，但其表达高峰时间在4h，较上清中出现的早.TGF-p:基 因表达在较低剂tI石英刺激后可明显升高，有随剂f增加而上升的趋势，与蛋白的变化 基本一致，就时间效应关系而言，各时间点之间虽然有先升高后降低的趋势，但差异无 显著性.石英剂10-200v以106细胞范围内，AM上清液作用于小鼠胚肺成纤维细胞， 可引起细胞增殖，从10011g/10细‘胞开始差异有显著性，并存在剂f效应关系.AM上 清TGF-p，蛋白水平与A570.进行相关分析，两者呈正相关，即TGF-p，水平越高，则成 纤维细胞增殖越强 ((r=0.76,P0.05)0 结论石英体外刺激小鼠AM，引起TGF-01蛋白和基因表达水平升高，且呈现剂蚤 一效应关系和时间一效应关系。经石英刺激后的AM上清液可导致小鼠胚肺成纤维细胞增 殖，有明显剂tI一效应关系，AM上清TGF-01越高，促增殖能力越强，二者呈正相关. 这说明TGF-01与石英引起的肺纤维化有明确的联系，它可能是矽肺发生发展一个重要因 素。 第二部分染石英小鼠TGF-p1Smads和胶原代谢的变化 一、TGF-p:在染石英小民中的表达 目的观察染石英小鼠肺组织TGF-伪蛋白和基因的表达，血清和支气管肺泡灌洗液 TGF-R1蛋白水平，研究其在矽肺肺纤维化及早期诊断中的意义。 方法采用基露式气管内注入法，对小鼠一次性染石英 (0.28/k8体重)01,3,5,7, 14,28d分批取样，免疫组织化学技术检测TGF-氏蛋白表达，用RT-PCR方法测定肺组 织TGF-01基因的表达，ELISA法测定血清和支气管肺泡灌洗液中TGF-01蛋白水平. 结果石英组小鼠肺组织中TGF-伪蛋白表达明显增强 (对照组见少量弱表达)，于 7-14d表达强度更高.石英组出现TGF-p:蛋白表达阳性AM，第5d达到高峰 (阳性率 93.40112.08%,P0.05).图像定I分析表明，小鼠肺组织TGF-01蛋白表达在第3.5. 华呐弃左丈笋间并丢笋 薄t尹世论戈 7,14d与对照组比较均有显著性差异 (各时间点间无明显差异)且于第7d表达水平达 最高 (40.2士2.0，阳性单位PU)o染石英第3d小鼠肺组织中TGF-几基因表达开始升高 (1.2010.15，比值)，第7d达到高峰 ((1.7410.19)，后开始下降，但直到第28d仍高于 正常.血清中TGF-0;蛋白水平，从染石英第5d开始明显高于对照组(107.5士9.9vs100.7 士4.3pg/ml,P0.05)，持续上升，第14d达到高峰 (118.4士16.9pg/ml)，而后呈下降 趋势。支气管肺泡灌洗液TGF-肠蛋白水平从第3d开始明显高于对照组(98.1士8.6vs83.2 士3.0pg/ml,P0.05)，第7d达到高峰((117.9士16.6pgdmt)，而后下降。血清与支气管 肺泡灌洗液中的TGF-伪蛋白水平呈现正相关((r=0.68,P0.05).肺组织轻脯氮酸含最 自染石英随时间延长呈持续上升的趋势。TGF-伪蛋白、基因表达水平与轻脯氨酸含量在 1-7d呈明显正相关 (TGF-p;蛋白r=0.98;TGF-p:基因r0.96,P0.05)e 结论TGF-p:蛋白和基因在染石英小鼠肺组织中的表达均呈现先升高后降低的趋 势，这与体外实验结果基本一致。TGF-伪蛋白和基因表达水平与肺组织经脯氮酸含量在 实验的一定期间有相关性。血清TGF-伪蛋白水平与BALF的呈正相关，提示血清TGF-民 可以反映BALF中该细胞因子的水平。结果表明TGF-p，在矽肺肺纤维化中起着一定的 作用，并可能将血清TG