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安徽科技学院学报，2013，27(6)：39—43
and
JournalofAnhuiScience
TechnologyUniversity
绿僵菌Argonaute基因片段原核表达载体的构建及其表达
汪章勋1”，孟慧敏2，周权2+
(1．安徽农业大学植物保护学院，安徽合肥230036；
2．安徽农业大学微生物防治省重点实验室，安徽合肥230036)
摘要：绿僵茵是一类广泛应用于生物防治的昆虫病原真茵。研究表明小RNA能够调控基因的表达，其
了Argonaute基因的部分功能片段，构建了其重组原核表达载体，将重组载体转化至大肠杆菌进行诱导表
达；采用镍柱亲和纯化重组的目的蛋白并通过Westernblot技术鉴定。结果发现：通过RT—PCR的方法获
blot
34kDa的目的蛋白条带；诱导5h后蛋白的表达量最高，采用镍柱亲和层析纯化重组蛋白，经Western
蛋白抗体的制备，并进一步通过该抗体获得绿僵茵体内的小RNA及其靶基因提供了基础。
关键词：绿僵茵；Argonaute基因；原核表达
中图分类号：s476+．12 文献标识码：A
and of Vectorof
Construction the
ExpressionProkaryoticExpression
GeneRelated from
Metarhizium
Argonaute Segment Anisopliae
WANG 1”．MENGHui—min2．ZHOU
Zhang—xun Quan2+
ofPlant
(1．SchoolProtection，Anhui 230036，China；
AgriculturalUniversity，Hefei
of
2．AnhuiProvincial MicrobialPest
Laboratory Control，AnhuiAgriculturalUniversity，Hefei230036，China)
Key
of is usedin have
aclass
Abstract：Asentomopathogenic widely biologicalcontrol，studies
fungi，肘：anisopliae
foundthatsmallRNAcan which an roleinthesmall
regulateexpression，in
gene Argonautegeneplaysimportant
RNA the of wasobtainedRT—PCRmethod
presentstudy，thepartial by
pathway．In
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