靶向敲降Sox4基因抑制宣威地区女性肺癌细胞系XWLC05裸鼠移植瘤的生长.pdfVIP

虫堡胜疽盘查!!!!生!旦笠堑鲞筮!塑g!也』Q!!!!：』!!!!堡!!!!：!!!：堑：堕!：! ．基础研究． 靶向敲降Sox4基因抑制宣威地区女性肺癌 细胞系XWLC一05裸鼠移植瘤的生长 周永春王熙才 陈艳黄尤光刘馨金从国 陈晓群李佳 黄云超 【摘要】 目的探讨抑制宣威地区女性肺癌细胞系XWLC-05中转录因子sox4的表达对裸鼠皮 下移植瘤生长的影响。方法构建靶向抑制Sox4基因的shRNA干扰质粒pGFP—V．RS—Sox4shRNA， 并转染XWLC-05细胞；采用实时荧光定量PCR和Westernblot检测Sox4的表达水平；将稳定转染重 组质粒的XWLC-05细胞接种于裸小鼠皮下，建立移植瘤模型；观测裸小鼠一般情况、成瘤情况和肿瘤 生长情况，计算肿瘤抑制率；对小鼠行CT扫描以观察肿瘤的转移情况；免疫组化染色检测移植瘤中 shRNA重组干 Sox4和ki-67的表达。结果成功构建了高效抑制Sox4基因表达的pGFP—V—RS—Sox4 扰质粒，并筛选出稳定转染的XWLC-05细胞。除接种生理盐水组外，接种稳定转染干扰质粒pGFP— shRNA的XWLC-05细胞组和 V—Rs—so“shRNA的XWLC-05细胞组、接种稳定转染pGFP—V—RS—scram 接种亲本XWI。C-05细胞组小鼠的成瘤率均为100％。空白对照组(不加任何试剂的亲本细胞)、阴性 对照组(转染质粒pGFP—V—RS—scramshRNA)和实验组(转染质粒pGFP—V—RS—Sox4shRNA)小鼠的体 醺均有不同程度的增长，但差异无统计学意义(P0．05)。与窄白对照组和阴性对照组比较，抑制 Sox4基因表达后的实验组小鼠移植瘤的增长趋势明显受到抑制，差异均有统计学意义(均P 0．05)。实验组离体移植瘤体积为(2．30±0．34)cm3，与阴性对照组[(3．99±0．45)cm3]和空白对照组 『(4．03±0．42)cm3]比较，差异均有统计学意义(均P0．05)。实验组离体移植瘤重量为(0．86± 0．14)g，低于阴性对照组[(1．84±0．27)g]和空白对照组[(1．86±0．22)g]，差异均有统计学意义(均 P0．05)。Sox4和ki-67蛋白主要表达于细胞核，实验组移植瘤细胞中Sox4蛋白的表达低于阴性对 照组和空白对照组，差异均有统计学意义(均P0．05)。影像学和病理学检查结果显示，在实验期内 成瘤小鼠的肿瘤均未发生远处转移。结论成功建立了宣威女性肺癌细胞系XWLC-05的裸鼠移植 瘤模型，干扰Sox4基因的表达呵抑制移植瘤的生长。 【主题词】 肺肿瘤；肿瘤移植；Sox4，基因；小鼠 Sox4 ofXuanweifemalecancercellline xenograftgrowth Targetedgene·knock-downsuppresses lung XWLC瞒cellsinnudemiceZhou Xicai，Chen Xin，Jin Yongchun，WangYah，HuangYouguang，Liu Yunchao．YunnanTumorResearch Congguo，ChenXiaoqun，LiJia，Huang Institute，fk孤i以Affiliated Medical 6501 18．饥ina HospitafofKunming University．Kunming Correspondingauthor：HuangYunchao，Email：huangych2001@aliyun．com To theeffectof Sox4 Offthe of 【