经诱导的绿色荧光蛋白转基因C57BL雄鼠脾细胞移植重建雌鼠造血功能研究.pdfVIP

· 28 · 生 旦筮 鲞箜 JTransplant(ElectronicEditi0n)November2011．Vo15．No．4 ． · 实 验 研 究 · 经诱导的绿色荧光蛋 白转基因C57BL雄 鼠 脾细胞移植重建雌 鼠造血功能研究 阮光萍 姚翔 王金祥 邓永丽 庞荣清 王强 潘兴华 【摘要】 目的 探讨雄性C57BL绿色荧光蛋 白(GFP)鼠诱导的脾细胞移植对造血衰竭小 鼠造血重建的作用。方法 建立小鼠造血衰竭模型，移植鱼卵提取物诱导的雄性 C57BL荧光鼠 脾细胞 ，检测诱导后细胞的干细胞标志抗原表达；观察受体存活时间，检测外周血白细胞计数 、外 周血GFP阳性细胞，进行荧光原位杂交检测Y染色体；各组受体脾和肺切片观察GFP细胞分布。 结果 鱼卵提取物诱导的雄性C57BL荧光鼠脾细胞比未诱导的脾细胞表达更多的干细胞标志 抗原。1×10。个脾细胞经尾静脉回输经致死剂量照射的雌性小鼠，明显延长小 鼠存活时问，提 高小鼠外周血白细胞计数。诱导组受体外周血中检测到GFP阳性细胞，骨髓中检测出60％的细 胞含Y染色体。诱导组受体脾和肺切片观察到 GFP阳性细胞分布。结论 鱼卵提取物诱导的 小鼠脾细胞中含较多的多能干细胞，回输给造血衰竭小鼠能重建其造血功能。 【关键词】 转基因鼠；绿色荧光蛋白；诱导性多能干细胞；移植；造血重建： 荧光原位杂交 Transplantationoffish oocytes extracts-induced spleen cells from green fluorescentprotein transgenicmaleC57BL mice to femalemiceforhematopoieticreconstruction RUAN Guang— ping， DXiang，WANGfin—xiang，DENG 一li，PANGRong—qing，WANGQiang， ⅣXing— hua．ResearchCenterofStem Cell，TissueandOrganEngineering，KunmingGeneralHospitalof ChengduMilitar$Command．Kunming65oo32．China Correspondingauthor：PAⅣ 一hua，Email：xinghuapan@yahoo．COrn．cn A【bstract】 0bjective Toinvestigatetheroleoffishoocytesextracts—inducedspleencellsfrom greenfluorescentprotein (GFP)maleC57BLmiceinhematopoieticreconstitutionofhematopoietic failurefemalemice．Methods Themodelofhematopoieticfailuremicewasestablished．Thespleen cellsofmalefluorescentC57BLmiceinducedbyfishoocytesextractsweretransplantedtofemalemice． Theexpressionofstem cel1markerantigensontheinducedcellswasdetected．Survivaltimeofrecipient micewasobserved，peripheralwhitebloodcellswerecounted，GFP—positiveperipheralbloodcellswere detected．andY chromosomewasdetectedbyfluorescence nsituhybridization (FISH)．Thespleen andlungbiopsiesoftherecipientmiceweredoneforobservationoffluorescentcelldi