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红曲霉(Monascus in
spp)莫呐可啉K(MonacolK)
高产菌株的诱变选育及其发酵条件研究
摘 要
从红曲样品中分离筛选得到一株Monacolin
K产率较高(高效液相色谱法,HPLC)
l
而桔霉素产率为0.1ng/g(酶联免疫吸附法,ELISA)的红曲霉菌株,编号为M12。
以之为出发菌株,通过诱变筛选,获得一株Monacolin
K产率有明显提高而桔霉素产
酵条件进行初步优化研究。具体包括以下五个方面的内容:
第一。从红曲样品分离纯化获得红曲霉菌株25株,以这些菌株和从中科院购得4
株红曲霉菌株,共29株作为菌种,制备得29个(固态)红曲样品。
第二,以上述29个红曲样品为实验材料,对红曲中桔霉素的(单向)薄层层析
(STLC)条件进行了研究。结果显示,以甲苯:乙酸乙酯:甲酸(6:3:1)为展开
剂,桔霉素的分离效果较好。按照该方法,对上述29个红曲样品中的桔
霉素进行了分析测定,筛选得到6个桔霉素含量低于0.2“g/g的红曲样品
及其相应菌株。
K的双向薄层层
以上述6个低桔霉素含量的红曲样品为材料,对Monacolin
析(DTLC)条件进行了研究。结果显示,以正已烷:乙酸乙酯:无水乙醚:甲酸
K含量最高为225“g/g(DTLC)
K进行了分析测定,得到1个Monacolin
的红曲样品及其相应菌株。
K含量,采用ELISA对桔
为了更准确地判断该红曲样品桔霉素和Monacolin
霉素进行了分析测定,结果显示,该样品中桔霉素含量仅为0.11ng/g。同
3
K含量为2l
K进行了分析测定,Monacolin
时,采用HPLC对Monacolin
ug/g。将该样品对应的菌株编号为M12。
p
K产率为213
通过上述研究,获得1株固态发酵产物Monacolin g/g
(HPLC),桔霉素含量为0.1
lng/g(ELISA)的红曲霉菌株M12。
第三,以M12为诱变出发菌株,采用紫外线、”Co—Y射线、硫酸二乙酯
K
为诱变剂对其进行处理。突变株的桔霉素产率采用STLC分析,Monacolin
采用DTLC分析,最后获得一株桔霉素产率低且Monacolin
K产率有明显提高的突
u
变株M12—69。以M12.69为菌种制备(固态)红曲,其MonacotinK产率达2143
0%,而桔霉素产率仅为O.13
g/g(HPLC).较出发菌株M12提高906.1 ng/g
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