河北省肾综合征出血热疫源地病原基因型及其分布特征研究.pdfVIP

中文摘要 河北省肾综合征出血热疫源地病原基因型 及其分布特征研究 摘 要 目的：了解河北省肾综合征出血热疫源地鼠密度、鼠 种构成、带毒率及宿主动物所携带汉坦病毒基因型和眶型的 分布，分析汉坦病毒核苷酸序列变异情况，指导对本病的预 防和控制。 方法： l 疫源地洲查，火夜法捕鼠，无凶耿鼠肿； 2用冷冻切片机切鼠肺，冷丙酮固定后，间接免疫荧 光法筛选汉坦病毒阳性鼠肺； 3 从阳性鼠肺，1二·提取汉坦病毒RNA，逆转录合成 cDNA： 4 根据已知汉坦病毒标准毒株的基因序列设计sE0 型和HTN型型特异性引物，用反转录套式聚合酶链反应 (R●nested PCR)扩增，进行基因分型； 5选择不同地区鼠肺PCR扩增产物经纯化回收后进 行序列测定，根据G1和G2片段分别构建系统进化树，对 河北省汉坦病毒的基因皿型分布、核昔酸变异及特征进行分 析。 结果： 1 2004～2005两年的鼠问疫情资料显示褐家鼠占总 捕获鼠利t的77．52％，是河北省的优势鼠种。河北省宅区鼠 种主要为褐家鼠和小家鼠，分别l与宅区总捕获鼠科·的 中文摘要 88．41％和10．85％；野外鼠种主要为褐家鼠、黑线姬鼠和人 仓鼠，分别占野外总捕获鼠种的50．6l％、13．72％和11．28％。 河北省宅区鼠密度为1．88％，高于野外鼠密度(1．14％)。 2将1139份鼠肺冷冻切片‘，冷丙酮固定后用间接免疫 荧光法进行检测，阳性鼠肺共35份，阳性率为3．07％。我省 肾综合征出血热疫源地带毒鼠主要以宅区褐家鼠为主，其次 为宅区小家鼠，野外带毒鼠不是主要传染源。 3对河：Ib省汉坦病毒阳性鼠肺同时用sE0型和HTN 型分型引物进行R■nested PcR扩增，产物经1％的琼脂糯 凝胶电泳后显示22份阳性鼠肺所携带汉坦病毒均为sE0 型，未发现HTN型。 4从小家鼠、小仓鼠、社鼠和田鼠四个河北省非优势 种群的鼠肺中扩增出423bp的特异性目的条带，证明它们携 带有sEO型汉坦病毒，存在“宿主溢出”现象。再次发现 仓鼠i咿科宿丰动物携带SE0，弘汉坦病毒。 5 汉坦病毒G1(195—573nt)区基因变异不大，同源 性高达94．7％～100％，且均与R22株的同源性接近，高达 94．5％～99．2％，与76一118株的I司源性较低，仪为69．9％～ 69．0％，可见同型之问M片段的基因序列相对比较保守。核 苷酸变异既有转换也有颠换。 6部分Gl和G2片段的核苷酸同源性比较及系统进化 树分析表明所测汉坦病毒均为SE0型，且以s3孤型为．1：， 未发现新皿型。除承德‘小家鼠所携带汉坦病毒根据G1” 段构建进化树分型为s4Ⅱ型，根据G2片段分型为s3弧型 中文摘要 外，G1和G2片段的分型结果基本一致。 结论： l 祸家鼠、小家鼠足_『|l』北省宅区．卜婴鼠利·，倒家鼠、 黑线姚鼠和人仓鼠是野外主要鼠种。褐家鼠是lⅡ北省的优势 鼠利r，并且是肾综合征出血热的主要传染源。 2河北省痰源地宿主动物所携带的汉坦病毒基因型以 SE0型为主，基因哑型以S3亚型为主，且在河北省广泛分布。 3河北省非优势鼠种小家鼠、小仓鼠、社鼠和川：I鼠均 可携带SE0型汉坦病毒，存在“宿主溢出”现象。 1 同型病毒在同种宿主t¨日对较稳定，不同种类宿主 动物可携带不同、肛型病毒，病毒变异可能与“宿主溢“j”有 荚。 关键词：肾综合征出m热：汉坦病毒；基因型；R-nested PCR：M片段；系统进化树 英文摘要 on and AnaJysjs Djstrjbutjon Genotype Characteri— za“onof