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RNA干扰HER-2基因对人乳腺癌细胞株SKBr3
细胞周期及增殖影响的研究
【中文摘要】目的:观察载体介导的RNA干扰技术能否有效抑制人乳腺癌细胞株SKBr3
表皮生长因子受体2(HER.2)的表达及其对细胞周期及体外增殖力的影响。
流式细胞仪检测细胞周期,四甲基偶氮唑盐MTT比色分析及集落形成试验检测细胞体
外增殖活力。同时构建针对绿色荧光蛋白基因的短发夹状siRNA的真核表达载体
pshRNA-GFP作为阳性对照。
明显,进一步检测其对细胞周期及增殖力的影响,结果发现与空白对照组比较,pshRNA
细胞百分数减少了18%,细胞凋亡达12.39%),细胞生长抑制率达48.2%,集落形成抑
明显影响。倒置荧光显微镜下观测到pshRNA-GFP转染后明显抑制绿色荧光蛋白基因
的表达。
结论:1.pshRNA-HER2真核表达载体构建成功;
HER2基因的表达;
2.pshRNA-HEP.2-1、pshRNA-HER2.2均可有效抑制SKBr3
因RNA二F扰靶位点;
胞体外增殖能力,RNA干扰技术为乳腺癌基因治疗提供了新策略。
【关键词】 RNA干扰;短发夹状RNA;表皮生长因子受体2;乳腺癌
2
The
EffectsofRNA
InteferencetoHER-2
GeneonCell and
Cycle
ProliferationofHuman
Breast
CarcinomaCellsinVitro
Objective:TowhetherRNA
investigate by
vector
plasmidcould
suppressepidermalfactor
growthreceptor
2(HER.2)
inhuman
breastcarcinoma
expression cellsSKBr3
andthee仃ect
oncell
and
cycleproliferation.
Methods:Thesmall
hairpin
RNA(shRNA)eukaryoticvector
expression
constructed
andtransfectedinto
culturedhuman
breast
carcinomacellof
lineSKBr3via
lipofectamine2000;TheinhibitedeffectsonHER2
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