神经胶质瘤缓激肽B2受体表达水平与其病理级别相关关系研究.pdfVIP

中文摘要 前 言 brain 血脑屏障(blood 密连接、基膜、周细胞、星形胶质细胞脚板和极狭小的细胞外隙构成。BBB 限制药物向脑组织的充分转运，因此限制了脑部疾病的治疗。多年来科学 家们一直在试图寻找一个安全高效的方法增加药物向脑组织转运以提高脑 部疾病的治疗疗效。其中最引人注目的是利用血管活性物质增加毛细血管 通透性的特性选择性开放BBB。正常脑组织的毛细血管对血管活性物质 增加其通透性的作用具有抵抗性，但是脑肿瘤组织的毛细血管或损伤部位 的脑组织毛细血管丧失了抵抗血管活性物质增加其通透性的能力。 神经胶质瘤在脑肿瘤中最常见，而且由于其易复发，治疗效果较差。近 年来许多研究者利用神经胶质瘤动物模型进行血管活性物质开放血肿瘤屏 障(blood-tumor 质引起BTB开放是有选择性的，即仅增加脑肿瘤组织毛细血管通透性而不 影响正常脑组织毛细血管通透性，大大减小了药物对于正常脑组织的细胞 毒性效应。目前最有效的且相对安全可控的选择性开放BTB的血管活性 物质是缓激肽或其类似物RMP-7(receptor-mediated 7)。研究证实缓激肽增加BBB通透性效应是通过缓激肽B：受体所介导 的。在临床实验中发现缓激肽或其类似物RMP-7引起的BTB通透性增加 的差异非常大。这种差异的存在限制了缓激肽及其类似物RMP-7在临床 上的推广和应用。我们推测这种差异的存在可能与脑肿瘤组织的缓激肽 B：受体表达水平有关。认清这种差异的原因是目前急待解决的问题。 本研究采用神经胶质瘤患者术后肿瘤组织标本，测定神经胶质瘤组织 的缓激肽B：受体的表达水平，与其病理分级相比较，分析神经胶质瘤缓激 肽B：受体表达水平与其病理分级的关系，试图从理论E弄清缓澈肽及其类 似物BMP-7引起的BTB通透性增加存在显著差异的原因，从而在临床治 疗中，筛选出适合应用缓激肽及其类似物选择性开放BTB转运药物进行治 疗的神经胶质瘤患者，切实提高神经胶质瘤的疗效和神经胶质瘤患者的生 存质量。 材料和方法 一、实验材料 1．标本本研究收集中国医科大学第一临床学院神经外科2002年5 health 例作对照。病理分级标准采用2000年世界卫生组织(worldorganiza- tion，WHO)中枢神经系统肿瘤分类标准。 2．主要试剂 chemilumi- 羊抗人缓激肽B：受体抗体和ECL(enhanced Cnlz nescence，ECL)试剂盒均购于美国Santa 化试剂盒均购于北京中山公司。 3．主要仪器匀浆机；台式低温超速离心机；电泳仪；转印仪；恒冷冰冻 切片机；Luzex．F实时图像分析系统。 二、实验方法 and 1．HE(hematoxylineosin，HE)染色进行脑肿瘤的病理诊断及分 级。 2．根据HE染色结果从标本中筛选出神经胶质瘤I级8例，神经胶质 瘤II级8例，神经胶质瘤III级8例，每个病理级别为一组，共三组。 3．Western Blot法测定缓激肽B：受体的表达水平，分析神经胶质瘤B： 受体表达水平与其病理分级的关系。 4．免疫组化SP法测定缓激肽B：受体的表达水平，分析神经胶质瘤B， 受体表达水平与其病理分级的关系。 5．图像分析 Western 5500 Chert Blot结果用Chemi ImagerV2．03软件扫描，用Huor 系统采集照片并进行半定量分析测得目标总面积占选区面积百分比值。 6．统计分析 1 采用SPSS 1．0统计