农杆菌介导多基因对冷季型草坪草的转化.pdfVIP

摘要 冷季型草坪草以其绿期长、草坪质量高，具有美化和观赏效果，并能供人休闲、游乐和适度 的体育运动，而倍受人们的亲睐。草地早熟禾、高羊茅和多年生黑麦草都是最广泛种植的冷季型 草坪草种。近年来全球水分紧缺，土壤盐化、次生盐渍化不断加剧，而种植抗早、耐盐的草坪草 能减少水分蒸发，抑制盐碱地土壤返盐，还可以用含一定盐分的水来灌溉，节省水资源。同时在 北方及过渡地带，许多草坪草品种都遭受到不同程度冻害，严重影响草坪景观。本研究的目的是 麦草，提高其耐盐、耐低温或抗旱能力。本研究主要在这方面取得了以下结果： 建立了草地早熟禾、高羊茅和多年生黑麦草胚性愈伤组织高频诱导与再生体系。研究结果表 明，成熟胚是诱导愈伤组织最理想的外植体，经50％硫酸处理缩短其出愈时间并降低愈伤组织污 染率。三种冷季型草坪草愈伤组织再生体系已完全具备了遗传转化受体系统的基本条件，这一结 果将为今后草地早熟禾、高羊茅和多年生黑麦草同种的草坪草的遗传转化受体系统的建立奠定牢 固的基础，也是冷季型草坪草的品种改良迈出的最重要的第一步。 本研究利用农杆菌介导技术首次对早熟禾、高羊茅和多年生黑麦草同时进行多基因SOSI、 伤组织的部分技术，包括液体共培养基、分化培养基、筛选技术和共培养技术，取得了比较理想的 转化效果，解决了农杆菌污染严重、转化效率低的问题。 爱瑞三号、爱神特植株。通过除草荆筛选获得了9l株独立来源的转化植株。选取部分植株进行 交结果表明外源基因在草坪草中基冈组中得以表达。 对转基冈植株的nl。片采H{标记涂抹除草剂，进行抗除草刑检测，对检测得剑的转基冈株系 To代进行盆栽实验，经盐、早胁迫处理，进行形态学、生长表型的观察比较。检测转基冈植株住 不同盐浓度条件卜．生理生化指标，结果表明：在盐胁迫条什卜．，转化株及对照株住质膜透性、体 内游离脯氨酸含鼙、丙_二醛含量、超氧化物歧化酶活性、过氧化氢酶活性、均出现显菥变化。 关键词：冷季型草坪革，多基冈，农杆菌，遗传转化，抗盐性，抗旱性 Abstract Cool-seasonwithits and thebeautificationandthe turfgrass longgreen high-quality,having ornamental Can the amusementandthemoderate much effect,andsupplypersonleisure，the sports，and tothe arundinaceaeSchreb．AndLoRum L．alethe L．，Festuca pernne people’Spro-gaze，oapratensis most cool—seasonturf grown grasses． widely Inrecent water salinization,and years，globalshortages，soilsalinization，increasingearlyplant turf canreducewater and returnsaltsalinebut resistance，salt-tolerant evaporation soil grass suppress alsocanbeusedwithsomesaltwaterto water．Atthesame thetransitionzone irrigation,save time，and inthe haves