PD—L1重组蛋白的表达及生物学活性分析.pdfVIP

生堡塞 塑 童堂 查 0o9年2月第23卷第1期 ChineseJExpClinVirol，Febmary2009，Vo1．23，No．1 ． 论 著 ． PD—L1重组蛋 白的表达及生物学活性分析 沈立萍，陈斯勇，边涛，伊瑶 ，王锋，邱丰 ，毕胜利 【摘要】 目的 构建细胞程序死亡因子 1配体 1(PD—L1)的重组表达质粒 ，在原核系统中表达 并分析其生物学活性 。方法 经密码子优化后合成 PD—L1全基 因序列 ，构建硫氧还原蛋 白．pET43b／ (PD．L1)重组表达质粒并在大肠埃希菌 中表达 ；用 ELISA验证表达产物与其受体结合 的生物学活性。 结果 正确构建 了PD—Ll重组表达质粒及其大肠埃菌基 因工程菌，能稳定、高效地表达 目的蛋 白，相 对分子质量为47X10，目的蛋 白能与其受体特异性结合。结论 成功获得有生物学活性的PD．L1重 组蛋 白，为研制单克隆抗体及其与病毒感染慢性化 的关系提供基础条件。 【主题词】 密码子； 细胞死亡 ； 重组蛋 白质类； 硫氧还蛋白 ExpresstherecombinantproteinPD ·L1inprokaryoticandanalyzeitsbiologicalactivity SHEN Li-ping， CHENSi-yong，BIANTao，YIYao，WANG凡ng，QlU ng，B1Sheng-li．NationalInstituteofViralDisease PreventoinandControl，ChineseCDC，Belting100052，China Correspond ingauthor：BISheng-li，Email：shengli bi@ 163．con — A【bstract】 Objective Toconstructtheprogrammedcelldeaht 1ligant1(PD—L1)recombination expressionvector，expressthefusionprotein inpmkaryoticandanalyzehtebiologicalaction ofexpressproduct． Mehtods ThewholePD—L1genesequencewassynhtesizedaftercodonoptimized．Constructhtethioredoxin一(PD— LI)recombinationexpressionvectorandexpresshtefusionproteininE．coli．Purifiedhtetargetproteinand analyzehteconjugatedabilityofproteinbyELISA．Results ThePD—L1recombinantexpressionvectorhasbeen constructedcorrectly．Thetargetproteinhasbeenobtainedwiht whichexpressedinhighefficiencynadproduction． ThetargetproteincanconjugatespecificallywihthtePD一1，itsspecificreceptor．Conclusion Wehaveobtained thePD—L1recomb inantproteinSuccesswith highbiologicalactivity．Theresultprovidethebasicconditionfor furtherstudyonantibodyandmutuallyactionbetweenPD—L1andchronicvirusinfectious． 【Keywords】Codon； Celldeaht； Recombinati0nproteins；Thioredoxin 细胞程序死亡因子 1(ProgrammedDeath．1，PD．1) 义 。现将实验过程和结果报道如下。 与其配体 1(ProgrammedDeath．1Ligant1，PD．L1)是