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临床医学论文-KONT真菌显色MIC药敏与ROSCO药敏纸片的对比研究
【关键词】? 念珠菌;微生物敏感性试验;耐药性
[摘要] 目的:研究KONT真菌显色MIC药敏与丹麦ROSCO药敏纸片扩散法检测酵母菌对抗菌药物敏感性结果的差异,方法:同时应用两种方法检测79株临床分离酵母对抗真菌药物的敏感性,并进行分析结果。结果:两种方法所策酵母菌对抗真菌药物的总符合率为98.2%,经配对χ2检测,差异无显著性(P0.05)。结论:KONT真菌显色MIC药敏试剂盒与丹麦ROSCO药敏纸片扩散法具有较好的重复性,而KONT真菌显色药敏具有操作简便,结果易判断,快速提供准确结果,具有在临床上应用盒进一步推广的前景。
[关键词] 念珠菌;微生物敏感性试验;耐药性
随着高效广谱抗生素的滥用,以及使用免疫拟制剂。肾上腺皮质激素。抗肿瘤药物、器官移植、导管插入或获得性免疫缺陷综合症等因素,真菌感染日益严重,抗真菌药物的广泛应用导致出现真菌的耐药现象[1]。因此,开展真菌的体外药敏试验,指导临床合理用药已受到越来越多的关注[2],为了寻求一种既准确可靠、方便易行,又与临床疗效相符合的检测方法,我们应用KONT真菌显色药敏试剂盒与丹麦ROSCO药敏纸片扩散法,分别对临床分离的79株酵母菌做药敏测试,探讨其结果的准确和一致性。
1 资料与方法
1.1 一般资料
1.1.1 试验菌 我院2005年1月至2005年6月确诊为酵母菌感染病例的标本共79份,其中呼吸道标本中分离率最高,与相关报道相似[3],用法国生物梅里埃ATB细菌鉴定系统ID32C板条和BIOKONT16C酵母菌鉴定板条(温州康泰生物科技有限公司提供)鉴定。经2次以上培养为同一种酵母菌后确定为病原菌,其中包括白色念珠菌57株、热带念珠菌13株、光滑念珠菌3株、季也蒙念珠菌3株、克柔念珠菌2株、近平滑念珠菌1株。
1.1.2 标准质控菌 为了保证测定的标准化和可信度,采用参考菌株白色念珠菌(ATCC 64548)作对照。由温州康泰生物科技有限公司提供。
1.1.3 KONT真菌显色MIC药敏试剂盒 由温州康泰生物科技有限公司提供的FUNGUS7试剂盒。
1.1.4 ROSCO药敏片和培养基 购于广州乐通泰生物科技有限公司。
1.2 方法
1.2.1 FUNGUS7真菌显色MIC药敏试剂盒药敏测定 用无菌水制备酵母菌悬液并调成2 Mcfarland浊度,取100 μl加入培养液中混匀,取药敏板一块,每孔加100 μl,30 ℃~35 ℃孵育20 h~24 h,每孔加显色液1滴,5 min后根据显色判断结果(红色为耐药;淡绿色为敏感)。
1.2.2 ROSCO药敏纸片药敏测试 用无菌盐水制备酵母悬液并调成0.5 McFarland浊度,再用生理盐水1∶1稀释(克柔念珠菌1∶10稀释)。用棉签将所制菌液挤干后均匀涂步至RPMI1640平板上,待表面干后分别贴上药敏纸片。并用标准菌株做质控。30 ℃~35 ℃孵育20 h~24 h后读取结果,如果生长不足再延长至48 h。
1.3 统计学方法 采用配对χ2检验进行数据处理。
2 结果
2.1 各质控菌株测定均在质控范围内,2种酵母菌药敏试验结果 见表1~表7。
表1 5氟胞嘧啶(5FC)对照结果(略)
注:结果符合率=(78/79)×100%=98.7%χ2检验:P0.05对照无差异。
表2 两性霉素B(AMB)对照结果(略)
注:结果符合率=(79/79)×100%=100%χ2检验:P0.05对照无差异检验
表3 制霉菌素(NYS)对照结果(略)
注:结果符合率=(78/79)×100%=98.7%χ2检验:P0.05对照无差异
表4 咪康唑(MIC)对照结果(略)
注:结果符合率=(75/79)×100%=94.9%χ2检验:P0.05对照无差异
表5 益康唑(ECO)对照结果(略)
注:结果符合率=(77/79)×100%=97.5%χ2检验:P0.05对照无差异
表6 伊曲康唑(ITC)对照结果(略)
注:结果符合率=(76/79)×100%=96.2%χ2检验:P0.05对照无差异
表7 氟康唑(FLU)对照结果(略)
注:结果符合率=(77/79)×100%=97.5%χ2检验:P0.05
比较结果见表8。
表8 不同菌种对2种方法检测的耐药率比较(略)
实验结果提示,KONT真菌显色MIC药敏试剂盒与丹麦ROSCO药敏纸片扩散法结果符合率基本一致。两种方法的总符合率为:(540/553)×100%=98.2%,经配对χ2检验,差异无显著性(P>0.05)。丹麦ROSCO药敏纸片扩散法接种液浓度的控制尤为重要,过
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