人骨髓基质细胞的生物学特性及其分化的研究.pdfVIP

人骨髓纂质细胞的生物学特性及其分化的研究 中英文摘要 摘 要 第一部分 人骨髓基质细胞的体外培养及其表型、组分分析 摘要 目的 体外培养和扩增人骨髓基质细胞，并探讨其表型及 细胞组成 体外静置贴壁培养和扩增人骨髓基质细胞，采用流 式细胞仪才翻少培养五代的骨髓基质细胞表面抗原CD33,CD34、 CD38,CDw90的表达情况和细胞DNA的含量。另外，通过免疫细 胞化学染色技术检测了不同代次儿童骨髓基质细胞的波形纤维蛋白 (Vimentin)、结蛋白(Desmin),x(一平滑肌肌动蛋白恤-SmoothMuscle Actin)和VIII因子相关抗原(VonWillebrandFactor)的表达。结果 人 骨髓基质细胞体外可培养传代至第九代。第五代基质细胞S期细胞含 量仅占16.1%，说明其分裂增殖能力已下降;CD33,CD34表达极低， 说明该培养方法所得的第五代细胞基本无造血细胞。另外，Vimentin 在传代过程中的表达水平逐渐下降，Desmin,cc-SmoothMuscleActin 单克隆抗体和VonWillebrandFactor抗体染色呈阴性沁论本文中的 骨髓基质细胞来源于间充质细胞，并不含血管内皮细胞;骨髓基质细 胞的组成和表型与体外培养条件有关。 关键词 」*a随基质细献体外长期培养;表型;免疫细胞化彰 第二部分 不同发育阶段的人骨髓基质细胞对多种病毒的敏感性 摘要 探讨不同发育阶段的人骨髓基质细胞对多种病毒的敏感 性。k法采用静置贴壁培养法，体外长期培养了胎，L,)L童和成人 骨髓基质细胞，并将传至5代以上的骨髓基质细胞采用微量细胞病变 (CPE)法，开展了对5种病毒的敏感性试验。结果人骨髓基质细 胞对滤泡性口腔炎病毒 (VSV),脊髓灰质炎病毒 (Poliov),I型和II 型单纯疤疹病毒 (HSVI,11)均敏感，能产生明显的CPE，其效价 (TCIDS0)可达10s-10-4，其中胎儿骨髓基质细胞对病毒敏感性至少比 儿童高2倍，比成人高4倍，即胎儿儿童成人，但对B3型柯萨奇 病毒均不敏感方结论人骨髓基质细胞对VSV.Poliov,41SV-1和 .种~，，，，，~~一一一一— 人骨髓基质细胞的生物学特性及其分化的研究 中英文摘要 HSV-11病毒是敏感的，本研究可为HSV病毒介导的基因治疗的靶细 胞选择提供依据。 关键词 人骨髓基质细v体外长期培养:微量细胞病变澎病 毒敏感性 第三部分 骨髓基质细胞IL-6的合成及其促诱生因素研究 摘要 目的探讨LPS和IL-3对骨髓基质细胞IL-6合成的调节效 体外静置培养建立基质细胞形成单层后，用IL-3(1Ong/ml) 应。令法: 或 LPS(10.100,1000ng/ml)刺激培养24小时后，收集上清，用 B9细胞的细胞增殖法检测 IL-6合成水平。结果 骨髓基质细胞基础 条件下可合成低水平 IL-6;LPS可促进其合成，最佳刺激浓度 100ng/ml;IL-3(IOng/ml)亦可促进IL-6的合成淤吉论骨髓基质细 胞基础条件下可分泌低水平IL-6参与造血调控，LPS和IL-3可通过 增加IL-6的合成而促进造血活动。 关键词:骨髓基质细胞 IL-6 LPS IL-3 第四部分 儿童骨髓基质细胞成骨分化的初步研究 摘要 目的 为了研究骨髓基质细胞((BMSC)的成骨分化功能。 仓法采用细胞静置贴壁培养法，体外培养了BMSC，采用成骨诱导 培养法研究儿童BMSC的成骨效应。结果 用成骨诱导培养法，可 使儿童BMSC骨