同型半胱氨酸与低密度脂蛋白相互作用机制研究.pdfVIP

同型半肤氨酸与低密度脂蛋白 相互作用机制的研究 硕士研究生:孙勇新 指导教师:朱 宁 副教授 指导小组 :惠汝太 研究员 专业名称 :内科学 (心血管病) 摘 要 厂 傀 火 载脂蛋白B-100(apolipoprotein,apoB-100)是已知分子量最大、 含氨基酸最多的载脂蛋白一 ，并且是低密度脂蛋白 (lowdensity lipoprotein,LDL)的唯一蛋白组分。血浆中LDL水平升高被认为是发 ,1动脉粥样硬化 (atherosclerosis,AS)和心血管病 (cardiovascular disease,CVD)的重要危险因子。而高同型半肤氨酸血症是新近发现 并证实的独立的心血管病危险因子，与某些危险因子如LDL、高脂血 症、高月叫。、血症等有协同作用乒报道，同型半，、酸硫内酉。 (homoc%steinethiolectone,HCTL)为同型半肤氨酸在体内的一种自然存 在形式，化堂胜质活泼，易与LDL中赖氨酸残基上的自由氨基发生缩 合反应，造成LDL空间构象变化，被修饰的LDL与LDL受体亲和力 卜降，却史易与清道夫受体结合，结果促进了动脉粥样硬化的加剧。 本课题日的即在体外研究同型半肤氨酸修饰的LDL不同单克隆抗体 (monoclonalantibody,mcAb)所对应表位处免疫反应性改变情况。为 此，我们利用超速离心的方法从正常人血浆中提取LDL，纯化、透析 后分为两部分， 部分用HCTL修饰，另一部分未经任何修饰作为对 照，1,14118种精确定位的单克隆抗体，做放射免疫分析 (radioimmunoassay,RIA)，来寻找出LDL被修饰后不同表位处免疫 反应性是否发生变化及改变的程度。结果发现同型半肤氨酸修饰的 LDL上单克隆抗体2D8.3F5,4G3所对应的3处表位免疫反应性降低， 并经Westemblot证实，此三个表位处免疫反应性降低发生在本表位自 身，而不是受其他表位处的影响。其中单克隆抗体4G3所对应的LDL 表位处在apoB-100结合LDL受体的区域，3F5所对应的LDL表位处 在apoB-100结合LDL受体的区域附近。同型半肤氨酸修饰的LDL在 2980-3084位处免疫反应性降低提示此表位处蛋白空间 构象可能发生变化，并有可能影响到同型半肤氨酸修饰的LDL与LDL 受体的结合。 关键词:载脂蛋白B-100,低密度脂蛋白;修饰 同型半肤氨酸 放射免疫分析， AStudyOnTheInter-reactingMechanismBetween HomocysteineAndLowDensityLipoprotein Graduatestudent: Sunyongxin Supervisor: AssociateProf.ZhuNing Supervisinggroup:Prof.Huirutai Speciality Cardiology Abstract ApoB-100istheknownlipoproteincontainingthemost ac记s andhasthebiggestmolecularweight,anditistheonlylipoprotein componentinlowdensiytlipoprotein(LDL).MoreovertheincreaseofLDL inplasmaisoneoftheimportantcardiovascularriskfactors,whichcan aggravateatherosclerosis(AS)andcardiovasculardisease(CVD).And hyperhomocysteinemiaisanewlyfoundandidentifiedindependentCVD riskfac