动物实验基本方法.pptVIP

动物实验基本方法 主要内容 进行实验操作前必须注意的事情 1. 实验动物作为人类的替难者进行各种生物医学研究。试验中要从动物福利和动物实验伦理学考虑，减少一些不必要的动物实验，如若不得不做的动物实验，要尽可能将动物的痛苦、压迫和不适降到最低。 2. 动物实验的实践性非常强，不能仅靠书本理论知识，需要通过反复实践加以掌握，以保证实验的顺利进行和减少动物承受的痛苦 国际上对动物实验伦理有如下五项要求: ⑴动物居住空间应符合标准,注意日常的饲育管理,不使动物饥饿、缺水和患病。 ⑵尽可能地采用代替法最少地使用和牺牲动物。 ⑶使用犬、猫和猴时，实验前应进行训练，尽可能地减少动物的恐惧和不安。 ⑷实验结束和动物不可能恢复时，应采取安乐死。 ⑸要爱护试验动物和对由于实验死亡的动物应持有怜悯和感谢之情。 一、动物的抓取 动物的抓取 小白鼠的捉持 捉拿时可先用右手抓住并提起鼠尾，置于实验台或鼠笼上，并稍向后拉；用左手的拇指和食指抓住小鼠两耳后颈背部的皮肤，将鼠置于左手心中，拉直后肢，以无名指及小指按住鼠尾或小鼠的左后肢即可。 动物的抓取 大白鼠的捉持 大白鼠的捉拿时，可戴上手套。实验者可用右手捉住鼠尾，放在实验台或鼠笼上，并稍向后拉；左手掌面向鼠背，食指和中指压住鼠的头顶，拇指和无名指分别从鼠的两腋下插入，将鼠的两前肢卡住；或拽紧鼠后颈及后背皮肤即可。 动物的抓取 动物的抓取 家兔的捉持 用一手抓住家兔颈背部皮肤，将兔提起，另一手托其臀部，使兔呈坐位姿势。 犬抓取注意点 不要轻易使用长柄铁钳，钳伤造成的伤害会使它对你更加恐惧，影响以后实验的进行。 抓取后用绳子将嘴绑住。 二、实验动物的麻醉方法 实验动物的麻醉方法 对实验动物进行麻醉的目的是：消除实验过程中引起的痛苦和不适，确保实验动物的安全和动物实验的顺利进行，是动物实验伦理的一个重要方面。 应结合实验目的、实验动物种类、日龄及健康状况等因素进行综合考虑，决定选用的麻醉剂和麻醉方法。 麻醉方法有全身麻醉和局部麻醉两种。在实验动物的麻醉中绝大多数采用全身麻醉。 实验动物的麻醉方法 常用非挥发性麻醉药的剂量 实验动物麻醉应注意的事项 麻醉之前应禁食，准确称量动物体重，作为计算麻醉剂用量的依据。 应注意不同麻醉药对动物的作用是不同的，如戊巴比妥钠、硫贲妥钠等能抑制心肌收缩力，使肌肉松弛，而氯胺酮则相反。 大动物犬、猴、羊等麻醉前半小时应注射麻醉前给药如阿托品和苯巴比妥钠。 静脉注射麻醉药是必须缓慢，边注射边观察动物。 在麻醉过程中密切观察动物的反应，动物在麻醉期间体温下降，应注意保温。 三、实验动物血液的采集方法 实验动物血液的采集方法 1、大鼠、小鼠的采血方法 剪尾采血 眼眶后静脉丛采血 颈(股)静脉或颈(股)动脉采血 摘眼球采血 断头采血 心脏采血 大小鼠不同采血方法的比较 实验动物血液的采集方法 2、豚鼠采血方法 耳缘切口采血 背中足静脉采血 心脏采血 3、兔的采血方法 耳缘静脉采血 耳中央动脉采血 颈静脉采血 颈动脉采血 心脏采血 实验动物血液的采集方法 4、犬的采血方法 后肢外侧小隐静脉采血 前肢背侧皮下头静脉采血 颈静脉采血 股动脉采血 实验动物血液的采集方法 各种实验动物活体安全采血量和致死采血量 四、动物各种体液的采集方法 动物各种体液的采集方法 1、尿液的采集方法 常用的采集方法较多，一般在实验前需给动物灌服一定量的水。 代谢笼法（适用于大、小鼠） 导尿法（常用于雄性兔、狗） 压迫膀胱法（适用于兔、狗等较大动物） 输尿管插管法 膀胱插管法 膀胱穿刺法 剖腹采尿法 反射排尿法 动物各种体液的采集方法 2、消化液的采集 唾液（直接抽取法；制造腮腺瘘法） 胃液（直接收集胃液法；制备胃瘘法） 胰液和胆汁（通过对胰总管和胆总管的插管而获得） 3、脑脊液的采集 狗、兔脑脊液的采集通常采取脊髓穿刺法 大鼠脑脊液的采集可采用枕大孔直接穿刺法 4、其他体液的采集 胸水的采集 腹水的采集 骨髓的采集 精液的采集 阴道内液体的采集 五、实验动物的处死方法 实验动物的处死方法 安死术的概念 “安死术”是指以人道的方法处死动物的过程。在处死动物过程中减少动物的惊恐或焦虑，安静地、无痛苦地死亡。 实验动物的处死方法 1、大鼠小鼠处死方法 颈椎脱臼法 急性失血法 麻醉致死法 断头法 击打法 实验动物的处死方法 2、犬、兔、豚鼠处死方法 空气栓塞法 优点：方法简单、迅速， 缺点：动物死于急性循环衰竭，各脏器凝血十分明显。 急性失血法 先行麻醉，再分离颈动脉或股动脉，将一根较粗的塑料管插入动脉内