多巴胺D-%2c1-受体基因、血管紧张素Ⅱ1型受体基因多态性与妊娠期高血压疾病相关性研究.pdf

郑州大学2006年坝Ij毕qp沦文 多巴胺【)I受体牲J★f、向竹紧张豢¨基因多态性b女E娠期r矗咖j卜坟稍的十H芙性研究 1型受体基因多态性 多巴胺D，受体基因、血管紧张素II 与妊娠期高血压疾病的相关性研究 研究生 马少平 导师 卢爱妮 郑州大学第二附属医院妇产科 河南 郑州 450014 摘 要 背景与目的 disorder 妊娠期高血压疾病(hypertensivecomplicatingpregnancy，HDCP)是 妊娠期特有的疾病，它是导致孕产妇和围生儿病率及死亡率升高的主要原因之 一。据美国的不完全资料，目前妊娠期高血压疾病发病率约为6％一7％的；我国的 发病率约9％。国内外学者对HDCP病因进行了大量的研究，目前认为，导致HDCP 的病因主要有四种学说，①免疫学说，②胎盘或滋养细胞缺血学说，⑨氧化应激 学说，④遗传学说。其中，遗传因素对该病的发病有重要的作用。近年来，随着 人类基因组研究的深入，寻找HDCP的易感基因已成为HDCP病因研究的新的热 点。 多巴胺Dl受体通过抑制Na+．K+ATP酶和Na+．H+交换提高肾钠的排泄，在原 发性高血压疾病研究中报道，在肾多巴胺产物或(和)多巴胺受体功能缺陷情况 下，高血压的发病率升高。国内外研究均证实多巴胺DI受体基因多态性一48～G 与原发性高血压病有关。由于HDCP与高血压的关系密切，高血压的易感基因也 可能是HDCP的易感基因，但有关多巴胺Dl受体基因多态性一48刖G与妊娠期高 血压疾病的关系目前国内外尚未见报道。 肾素一血管紧张素系统(renin—angiotensionSystem，RAS)是已研究证实 的机体调节血压的关键系统，它在维持机体水盐平衡和调节心血管活动中起着十 分重要的作用。这其中以血管紧张素II的作用最强。血管紧张素主要通过血管紧 张素受体(AT)发挥生理作用，人类AT．是血管紧张素II发挥生理效应的主要受 jcIf州人学2006，干硕I’毕、Ip沦建 多巴胺DI受佧坫…、㈨竹紧jK亲II驰…彩杏性与女}娠期高咖¨拽柄f内州戈性研宄 体，其受体发生分子生物学变异，势必会影响其生理作用的变化。国内外已有研 l型受体A¨66位点突变与HDCP有关。但关于HDCP的病因 究证实，血管紧张素II 不同国家，不同区域也存在着致病基因的差异，因此有必要探讨本地区与HDCP 发生关系密切的易感基因。 本研究应用限制性片段长度多态性聚合酶链反应(RFLP．PCR)、限制性酶 切及电泳分型方法，对正常妊娠妇女及HDCP患者进行多态性位点变异分布分 析，为HDCP的遗传病因学提供依据。 材料与方法 大学第二附属医院、濮阳市人民医院住院的汉族孕妇。取正常妊娠孕妇为对照组， HDCP患者为研究组，均为单胎、初产，无原发性高血压、糖尿病、心脏病、肾 病、肝病病史。入院第二天清晨抽取外周肘静脉血2ml，EDTA．K2抗凝，一80℃ 低温冻存。 用DNA提取试剂盒抽提外周血DNA，PCR扩增限制性内切酶切割，EB染色， 琼脂糖凝胶电泳，紫外光下分析凝胶确定基因型，PCR产物用限制性内切酶DdeI 146bp两种片段。ATl若有A—C突变，切割产生1 39bp和2llbp两种片段，所以， 两条带。计数基因型频率和等位基因频率，进行Hardy．Weinberg平衡法检验和卡 1 方检验，当尸0．05时认为差异有统计学意义。采用SPSS0．0软件进行统计学处理， 结果 (1)群体代表性检验：按Hardy—Weinbe唱平衡法检验样本代表性，差异无 统计学意义(JD0．05)，样本具有群体代表性： (2)多巴胺Dl受体等位基因A和G在HDCP组和正常孕妇组的分布频率分别 为72．1％、27．9％和90．7％、9．3％，两