moesin分子与内毒素致病和肝病关系研究.pdf

主要英文缩写目录 moesin分子与内毒素致病和肝病关系研究 摘 要 目的 探讨moesin分子在内毒素致病的信号传导过程中的作用和在不同肝病中的表达 程度，评估中药板蓝根活性成份抗内毒素的疗效。 ， (方法 分动物基础实验和临床实验两部分。 基础实验是先建立小鼠内毒素血症模型，采用原位杂交法和RT—PCR法检测体 检测NO浓度，从量效和时效关系上分析内毒素刺激小鼠后组织内moesin表达情况： 用体外培养法，分离小鼠腹腔内单核细胞在含有LPS的培养液中进行培养，用板蓝 克隆抗体阻断n吓活性等干预因素分组进行干预，培养9小时后测上清中的TNF— Q，IL一6，NO水平，测培养细胞中的moesin 究资料推断moesin分子在内毒素致病信号传导过程中的可能作用。 中药板蓝根有效成份的提取采用氯仿乙醇萃取法，用体外法、半体外法对板蓝 根各组份抗内毒素活性能力进行比较，然后选取最有效的成份用于上述干预试验。 临床部分应用上述方法对各型重型肝炎患者外周血中单核细胞内moesin分子 的表达水平进行检测，用鲎血基质法定量检测血中内毒素含量，将moesin表达的计 另外选取不同肝病患者包括急性重型肝炎，亚急性重型肝炎，慢性活动型肝炎，肝 癌的肝组织内moesinmRNA表达。 结果 一．成功建立小鼠内毒素血症的动物模型。表现为LPS刺激后，血中n师一 Ⅱ、IL．6、NO升高，且与LPS剂量呈正相关性。 二．量效关系中，当LPS剂量为lO∥g体重时，moesin表达呈大幅度增加， 达20n∥g体重时达高峰。时效关系中，LPS注射后3小时表达开始增加，至6小 时达高峰并持续至12小时。表达强度在肝内高于肾内，肾内高于脾内。 三．板蓝根活性成份(I，rI，m，Ⅳ，V)中，第1Ⅱ组份抗内毒素能力最强。 体外法显示，当稀释至32倍时仍能抑制内毒素活性；半体内法试验中，应用第Ⅲ 13 8_+31．4)，差异有极 4-22．2，明显低于只用LPS组(1 分分别为21．4±18．4，29．1 显著性意义(P0 表达计分值与同期所测的TNF—a，NO水平呈正相关。 TNF．n、IL一6、NO水平无明显上升，与单独加入LPS后这些指标显著增高相比， 降外， IL．6、NO水平上升不明显。 4- 五．临床实验中，与健康对照组比较，急性重型肝炎组内毒素水平(O．737 o．236 mRNA在慢性重型 1,52EU／ml差异有极显著性意义(pO．01)。单核细胞内moesin 肝炎中表达显著，亚急性重型肝炎中次之，而急性重型肝炎表达不明显，与对照组 六． 不同肝病的肝组织内moesin表达：在原位表达中，慢性活动型肝炎和肝 性活动型肝炎，亚急性重型肝炎和急性重型肝炎，与原位杂交结果基本一致。／／ 结论 一． 内毒素刺激可引起moesin表达增加，且呈剂量和时间依赖性；在各组织 器官中表达程度不一。 受体而发挥作用。 三．进～步证实板蓝根具有抗内毒素作用，经提取的各成份中第三组份作用 最强，它可能是直接封闭了内毒素的毒性部分而发挥作用的。通过对内毒素活性的 抑制， moesin表达也受到一定影响。 四．Moesin分子在慢性重型肝炎中表达增高，主要因为是慢性重型肝炎时内 毒素血症的发生率较高而引起。Moesin分子可能参与病毒性肝炎的慢性化和重症化 的病理生理过程。 本研究认为，moesin分子参与了内毒素致病过程，也与病毒性肝炎慢性化和重 症化有关，值得进一步研究。 ， 关键词： 脂多糖膜结构伸展刺突蛋百板蓝根肿瘤坏死因子 白细胞介 素一6 一氧化氮 丝裂原活化蛋白激酶重型肝炎肝癌