脐血间质干细胞移植治疗肌萎缩侧索硬化应用研究.pdf

脐血问质干细胞移植治疗肌萎缩侧索硬化的应用研究 研究生曹勇 导师宋来君杨波 郑州大学第一附属医院神经外科 河南 中国 450052 摘 要 背景和目的： lateral sclerosis，ALs)是一种既累及上运动神 肌萎缩侧索硬化(棚yotrophic 经元(大脑、脑干及脊髓等)，又侵袭下运动神经元(颅神经核和脊髓前角细胞) neumn 的神经系统变性性疾病，是运动神经元疾病(motor diseaSe，MND)中最 常见的类型，病因不明，患者多在确诊后3～5a内死亡，流行病学显示该病的发 生率呈上升趋势。目前常用的抗兴奋毒性治疗、清除自由基疗法、免疫治疗以及 神经保护疗法等效果有限，因此寻找更加有效的治疗方法是I}笛床神经科医师的迫 切需要。 近年来，随着干细胞基础研究的不断深入，干细胞移植在生命科学、医学生 物学和基因工程等众多领域展现出广阔的应用前景，细胞治疗(cytotherapy，cYT) stem 胎干细胞(embfyoniccells，EScs)植入ALs试验鼠的脑脊液中治疗铷LS，实 验结果显示实验鼠瘫痪后肢的运动功能明显恢复，检测发现6％的干细胞迁移入 脊髓内部并且表达神经细胞特异的表面标记，提示迁移细胞已分化为神经元样细 胞。Ja趣on等将外周血干细胞植入ALs试验鼠脑脊液中，结果同样发现试验鼠 的运动能力及行为能力得到改善。上述研究均表明干细胞在治疗神经系统变性性 疾病——AIs方面具有巨大潜力。2()03年Mazzini L等开展采用自体骨髓间充 stem 质干细胞(bonemarr州mesenchymalcells，BM—MSCs)髓内移植治疗ALS 疾病的临床研究，结果证实Mscs移植治疗ALs是安全可行的。 然而作为一种病因未明，渐进性发展的变性性疾病，ALS的治疗是一个长期 的、需多次移植的复杂过程。而作为细胞来源的自体骨髓MsCs存在诸如成年患 者自身Mscs数量较少、活力较低；采集方式烦琐且疼痛令人难以接受等诸多缺 licalcord 陷。近年来越来越多的研究显示脐血(Umbj Blood，UCB)中不仅含造 sIem 血干细胞(hemalopoieticceJlsHscs)，而且含具有多向分化潜能的Mscs，体外 培养条件下脐血MScs能够分化为神经元细胞，人脐血MScs移植治疗脑缺血、帕 金森病(Parkjnson’s djsease；PD)等动物实验研究也取得可喜的效果。与骨髓相 比，脐血作为MsCs的新来源具有下列优点：采集简便，对母婴无不良影响；弱 免疫源性，与异体骨髓相比，其所引起的移植物抗宿主疾病哂an．versus．host virus， disease，GVHD)的发生率较低且程度较弱；脐血中的巨细胞病毒(CyIomcgalo cMⅥ和EB病毒∞stein-barrvirus，EBV)等感染率低，移植过程中传播疾病的机 率较少等。因此脐血比骨髓更适宜于作为Mscs的来源。 本实验拟通过静脉滴注和腰穿方式移植脐血Mscs治疗—～LS，观察移植过 程中趟5患者临床症状与体征的演变、检测其血浆和脑脊液中谷氨酸(西utamate， Glu)水平的变化，同时测评其多系统神经功能的演变，全面评估脐血MsCs移植 对灿S疾病的综合影响，为脐血MsCs更广泛的临床应用提供参考资料、积累 应用经验。 方法： 1脐血Mscs培养：采用密度梯度离心法分离健康自然分娩产妇志愿捐献的 脐血，获得脐血单个核细胞(mononucI