辛伐他汀对SAH后迟发性脑血管痉挛预防作用实验研究.pdf

中文摘要 辛伐他汀对SAH后迟发性脑血管痉挛预防作用的实 验研究 摘 要 目的：迟发性脑血管痉挛(DCVS)是动脉瘤性蛛网膜 下腔出血(SAH)后致死、致残的主要原因。炎性相关基因 尤其是炎性细胞因子在痉挛动脉中表达增加表明脑血管炎 性反应可能参与了持续性脑血管痉挛形成。核因子一KB (NF．K B)是一个广泛存在的转录因子，通过调控炎症相 关黏附分子和细胞因子的表达在炎症应答中起着重要的作 用。有研究表明，辛伐他汀除降血脂作用之外，尚具有一定 的抗炎作用。本研究中我们采用兔枕大池二次注血脑血管痉 B 挛模型，观察经口灌服辛伐他汀对家兔基底动脉中NF—K 表达的影响及对DCVS的预防作用，为临床应用奠定基础。 方法：雄性新西兰大白兔64只(由华北制药厂质检中 采用枕大池二次注血制作SAH模型，在氯胺酮(30m∥k)、 氯丙嗪(10mg／b)肌注麻醉下，受试动物取俯卧头低位， 枕部手术区剃毛备皮常规消毒后用4．5号注射器针头行枕大 池穿刺，缓慢抽取脑脊液约1ml，随后取未抗凝耳动脉血 (1．Oml／妇体重)于3分钟内缓慢注入枕大池，保持头低脚 高位(与地面成30。角)30分钟，48小时后重复上述过程， 并分别在第一次注血后Day4、Day7、Dayl4分三批处死， 分为2．5 mg爪g、5mg／kg和7．5mg／kg三个亚组(各8只)， 中文摘要 予淀粉片7．5mg／l(g代替辛伐他汀，第一次注血后Day7处 死；④假手术组(n=8)：受试动物仅做枕大池假穿刺假注 血，第一次注血后Day7处死以作对照。 HE、免疫组化检查及免疫蛋白印迹(W．estemBlot)分 ◆ 析：实验动物用氯胺酮50mg爪g快速静推，断头处死，取 含有基底动脉全长的脑干组织，其中上1／2部分置于4％多 聚甲醛溶液固定48小时，供组织学及免疫组化检查；将余 下的l／2段基底动脉迅速剥离，放入液氮中保存以备Westem Blot检测。 采用华东理工大学自动化所细胞免疫组织化学分析系 统Version2．O自动分析仪记录阳性细胞百分率。各组数据 1220 V5．50对免疫蛋白印 DocumentationAnalysissystem 迹结果进行定量分析，其面积灰度值以积分光密度值 (intemal opticaldensity’IOD)表示。 1 应用SPSSO．O软件包进行统计处理。两样本均数问的 比较用t检验；多样本均数间的比较用单因素方差分析，以 PO．05为有显著差异。 结果：1．m染色结果：光镜下显示假手术组动物基底 动物于Day7时基底动脉均出现不同程度管径变窄，管壁增 厚，内膜出现皱折，此两组间内径比较，无明显差异 (PO．05)。SAH+辛伐他汀组血管痉挛程度明显减轻，并有 一定量效关系，与SAH组、SAH+ADT两组相比基底动脉 内径狭窄程度有统计学差异(PO．O 1，Table1， 1)(Fig 中文摘要 TabIe2)。2．免疫组化结果：当不用一抗或被同类型的对照 B 抗体替换时，DAB染色缺乏。免疫组化结果显示NF—K (及TNF．0【)在假手术组少量表达，而在SAH组和 B在胞浆内和 ■ SAH+ADT组在day7时间点表达增加。NF．K r一一 胞核内表达，血管内皮细胞与平滑肌细胞均有NF．KB的表 ≮、 达(Fi9