乌头类生物碱对照提取物制备及应用研究.pdfVIP

目录 摘要 1 Abstract 2 第一章 综述 3 第二章 双酯型乌头生物碱对照提取物的制备和化合物的分离 12 .1 双酯型生物碱提取物的制备 12 .2 单体化合物的分离 12 .3 实验部分 17 第三章 双酯型乌头生物碱对照提取物的标定及其在草乌药材生物碱含量测定中的 应用 19 .1 仪器与试剂 19 .2 色谱条件 19 .3 北乌头碱纯度的标定 19 .4 对照提取物的标定 20 .5 双酯型乌头生物碱对照提取物在草乌药材含量测定中的应用 24 第四章 单酯型乌头生物碱对照提取物的制备 29 .1 水解条件的选择 29 .2 结果 30 .3 实验部分 31 .4 结果讨论 31 第五章 单酯型对照提取物的标定及在制草乌药材含量测定中的应用 32 .1 仪器与试剂 32 .2 色谱条件 32 .3 苯甲酰北乌头原碱纯度的标定 33 .4 乌头类单酯型提取物含量的标定 33 .5 乌头类单酯型对照提取物在制草乌药材含量测定中的应用 37 总结42 参考文献45 附图 50 致谢 55 摘要 草乌为毛茛科植物北乌头Aconitum kusnezoffii Reichb 的干燥块根。主要分布于 我国内蒙古、北京、山西、吉林、黑龙江、辽宁等地。中医理论认为其有大热、大 毒的药性，味辛、性苦、热、有大毒。归心、肝、肾、脾经。能祛风除湿，温经止 痛，用于风湿麻痹、关节疼痛、心腹冷痛、寒病作痛、麻醉止痛等，广泛应用于中 医临床。 草乌中主要的有效成分为二萜生物碱类。《中国药典》2010 年版草乌项下规定 乌头碱、次乌头碱和新乌头碱三种双酯型生物碱的含量作为控制指标，而制草乌的 检测指标成分为以上三种双酯型生物碱的脱乙酰基的苯甲酰乌头原碱、苯甲酰次乌 原头碱和苯甲酰新乌头原碱。常规检测需要6 个单体对照品，制备难度较大，检测 成本高。对照品的制备工艺复杂，耗时耗力，一直被认为是中药质量控制的瓶颈。 中药对照提取物凭借自身价格低廉、专属性高、配制简便的优势已经成为近年来中 药标准物质的发展趋势。 本文针对以上情况，本论文从草乌药材中提取分离得到了双酯型生物碱的对照 提取物，主要包含乌头碱、次乌头碱、新乌头碱以及北乌头碱四种（总含量超过90% 以上）。并以提取分离得到的双酯型生物碱提取物为原料水解得到了单酯型生物碱 对照提取物，主要成分为苯甲酰乌头原碱、苯甲酰次乌头原碱、苯甲酰新乌头原碱 和苯甲酰北乌头原碱（总含量达到 45% 以上）。并分离得到了北乌头碱和苯甲酰新 乌头原碱的单体，进而分别对双酯型及单酯型对照提取物进行了标定定值。最终以 对照提取物为对照，建立了草乌药材中4 种双酯型生物碱、制草乌中4 种单酯型生 物碱含量测定的方法。 比较了使用对照提取物与单体进行生物碱含量测定的结果，单酯型和双酯型的 标准偏差均小于3.5% 本文为以定量用对照提取物替代单体对照品作为含量测定用对照物质，并更为 客观的评价草乌头类药材的质量提供了重要的实验基础和方法模式。本课题还根据 香港中药材标准研究工作指引，开展生草乌港标药材标准中薄层色谱鉴别、指纹/ 特征图谱和含量测定项的方法研究。 关键词：草乌 二萜生物碱 对照提取物 1 Abstract In traditional Chinese medicine system, Caowu is the dried toots of A.kusnezoffii and belongs to the ranunculaceae family. It ‘s first appearance ever written in