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摘要………………………………………………………………………………～．．．!‘ooJU …I
1
一……………………………………二．二………………～㈣0…。
1．4．2蛋白质磷酸化与去磷酸化在信号转导中的作用………………………………………………………12
1．4．3高温胁迫对原生质膜透性的影响………………………………………………………………………13
1．7技术路线…………………………………………………………………………………………………．14
2．真姬菇菌丝全蛋白的提取及检测………………………………………………………………………．．16
2．1．1真姬菇菌株……………………………………………………………………………………………．．16
2．1．2试验培养基材料………………………………………………………………………………………．．16
2．1．3常用试剂及溶液配制……………………………………………………………………………………16
7
2．1．4仪器……………………………………………………………………………………………………………．．，………………………一1
2．2试验方法…………………………………………………………………………………………………．。17
2．2．1真姬菇菌丝培养及高温处理…………………………………………………………………………“17
2．2。2蛋白质样品制备——真姬菇全蛋白的提取…………………………………………………………。17
8
Bradford法定量蛋白质样品浓度………………………………………………………………………l
2．2．3
8
2．3结果与分析………………………………………………………………………………………………．．19
2．3．1Bradford标准曲线………………………………………………………………………………………J9
9
2．3．2SDS—PAGE检测三种方法所提取的全蛋白……………………………………………………………l
2．4讨论…………………………………………………………………………………………………………………………………………．20
3．真姬菇菌丝全蛋白双向电泳技术的建立…………………………………………………………………．22
3．1试验材料…………………………………………………………………………………………………．22
3．1．1真姬菇菌株……………………………………………………………………………………………．．22
3．1．2常用试剂及溶液配制……………………………………………………………………………………22
3．1．3仪器……………………………………………………………………………………………………。22
3．2试验方法…………………………………………………………………………………………………．．23
3．2．1真姬菇菌丝全蛋白的pH分布…………………………………………………………………………23
3．2．2蛋白质上样量、胶条水化时间…………………………………………………………………………23
3．2．3等电聚焦时间……………………………………………………………………………………………23
3．2．4双向电泳检测三种全蛋白提取方法……………………………………………………………………23
3．3结果与分析………………………………………………………………………………………………．．23
3．3．1胶条长度及pH范围的选定……………………………………………………………………………23
3．3．2蛋白质上样量、胶条水化时间的比较…………………………………………………………………24
3．3．3聚焦时间…………………………………………………………………………………………………25
3．3．4比较
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