累及单核系统急性髓性白血病细胞遗传学分析及荧光原位杂交检测MLL基因受累表达.pdf

中文摘要 累及荤核系统急性夔羲自懿瘸缨照遗俦学分橱及荧光原链杂交 检测MLL基因受辫表达 摘要 弱的应霸常瓶细胞遗传举分析结合荧光原位杂交技术(双色FISH)梭溯累 leukemia 基霹MLL(mixedlineage 羲表这，臻讨MLL蒺西受累斡梭溅在急幢鑫痰瘸分墼诊鞭中魏意义。 方法 (1)标本获取及分组采集113例臼血病病人殿20例对照缀胬髓进 行染能体培养制备及细胞冻存，t13例病人(男67例，女46侧，年龄g月。80岁， leukemia，M硒藉漤 中经年羚32岁)，按FAB套墼努靛缎貔性囊盘瘸l；ll(myeioid 巴缁施侄自盘病缀(1ymphoblastic 4镄，宠垒缓瓣瘸A 缓解瘸入骨髓及外阚血幼稚细胞比例均大于60％。⑧CML婀10例，初诊病人9 例及米缓解病人l例。④CLL缳5倒，初诊瘸人4例及未缀解病人l铡。对照 瓣瘤患者，骨髓常瓶检查未觅异常。24小时短期体井培养，收获前l小时予 固定3次，离心，制器缨胞悬波，涛冀，玻冀标本子预湿87。5℃瓣Earles溶渡 分钟，流水冲洗。待干，镜检。彳亍细胞遗传学分析，检测辩常核型，特别是累 计l1q23的核型变化。(2)常规镜梭及检查结果判定：已制蛰的玻片标本予与常 援辘捡，每令异赘骧謦耘本镜捻lO个分裂像，疰常瑗嚣标零镜撞2§个分裂豫。 镜捡缔果按入类缁胞遗传学国际命名体铜(ISCN1995)命名；(3)荧光原位杂交及 结果判断{双色FISH探针来源于vysis Spectra Vysion双匏FISH探针试剂盒 (Applied Imaging公霹)。鳇D～Fls珏探针楚经滚式鲴赡便分选、显微韬裁露 莠经PCR扩增豹双稳搽锌，经缺口乎移洼应用2耪荧竞索标记，《蔷成攘针泡。 按操作步骤行原位杂交，应用易能涉及的基因的全长探针，采用红绿两种荧光 素分别标记被断裂点分开的1个旗因的两部分，结果正常细胞中可见2个黄色 售号*褥器露舞藏率阿冕l红、l绿秘l令黄氇《红绿敲会)鹱l缀窝1个黄色 杂交信号，表明发擞了MLL基阂断裂与重摊。将所得数据避行统计学分析，判 中文摘要 断MLL基因受累情况。 结果 (1)舞组异常核型结果：④异常核型结果：AML组共发现异话核型 7例；ALL组共发现异常核型5例，L1型：2例，L2型：3例，L3型：0例； CML组发现异常核型9例：CLL组发现异常核型2例。对照组0例②异常核 稳吞噬盘缀魏的现象，Auer小体未觅，获CR，讴早期复发，生存裁未超过3 AML-M2审报遵鬃及1 Iq23豹核鼙异鬻共4铡，分子学可觅MLL基因改交。(Ⅳ) 捌，嚣嚣髓痰态遗盎襄史，未怒至《联徽体。(v)+8觅予g％的AML，为最常凳 自囊疯哥兹额强弱染色体羚卷，其中性染铯体丢失最多冕f73獬，蔟次为9号染 (9q一)改变。(v珏)在我们妁硪定中，还发现了一令世器上没蠢报道的治疗耀关蛙癌 瑞金医院焱液病研究所进行FISH定位，希望庶用条带序列FISH探钞憋精确黢 裂位点定出，并应用分子生物学的方法，拿到融台基因。④双色FISH结果：3 色(红绿融台)杂交信号，表明发生了MLL基因断裂与重排，符合细胞遗传学 结果所见。 结论本研究采用常规细胞遗传学方法结合荧光原位杂交技术。对113例 急性自血瘸病人染色体标本和20例对照组染色体标本进行研究。间时结合临床 资料，着重研究了累及单核系统急性髓性囱血病的细胞遗传学情况。发现临床 治疗反应俄，CR率高(90％)，MS52个月，但易于复发。儿童患者的预后不如成 反武维甲酸治疗有效，反之刚无反应，表明t(15；17)的有无对AML—M3的治 中文摘要 17)的AML—M3对维甲酸治 疗有指导作用，而伴有t(1l；17)(q23；q21)芹11t(5 疗不敏感； in