阿特拉津对斑马鱼(Danio rerio)性激素合成相关基因表达及精巢发育的影响.pdfVIP

阿特拉津对斑马鱼(Danio rerio)性激素合成相关基因表达及精巢发育的影响.pdf

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摘要 摘要 阿特拉津(Atrazine,ATZ)是一种用于去除一年生禾科和阔叶杂草的除草剂, 目前已经成为河流、溪流和地下水中最常见的农药污染物之一。ATZ可以对水生 生物的生长和发育产生不利的影响,还能够影响性腺的发育和生殖,对精巢的结 构、精子的生成和活力产生干扰甚至出现损伤。多数研究认为ATZ可以对哺乳 动物、两栖动物和鱼类的内分泌系统产生干扰,但是另一些研究却出现相反的结 果,因此关于ATZ是否有干扰内分泌效应、影响精巢发育等作用还存在着较多 的争议。 鱼类精巢发育受类固醇性激素的调控,类固醇合成中重要的蛋白因子和相关 酶基因的表达反映了类固醇激素的合成速率,而类固醇的水平对性腺的发育产生 重要的影响,这整个过程受到HPG轴的调控。关于ATZ对哺乳类类固醇激素合 成、精巢发育影响方面的研究比较多,但是具体的毒性机制仍不清楚,而相关的 内容在鱼类中的研究则很少,影响对水体中ATZ风险的准确评估。 本文将成年斑马鱼 (Daniorerio 暴露于不同浓度 (0、0.01、0.05、0.25、0.5、 1.0、2.0mg/L ATZ 中21d,分别用荧光定量PCR (q-PCR)方法检测斑马鱼精 ELISA E2 巢性激素合成相关基因的表达;用酶联免疫( )方法检测了精巢中 和 11-KT的含量;常规组织学方法研究斑马鱼精巢组织形态学变化,获得如下结果: (1)低浓度ATZ对肝脏 VTG产生诱导效应。0.01mg/LATZ诱导VTG的上 调,其他浓度组并无显著变化,这种诱导无浓度效应关系,而ERα均没有出现显 著诱导,因此低浓度ATZ并不是通过核受体途径而可能是通过膜受体途径诱导 VTG的表达。 2 ATZ ATZ ( 使雄性激素合成相关基因的表达出现下调,高浓度 导致体内 雄激素水平降低;ATZ诱导雌激素的合成。精巢中除0.01mg/L,各ATZ浓度组 的雄激素合成相关基因(ff1d、StAR、CYP17a1和CYP11b)均显著下调,而T 11-KT ATZ CYP19a1 E2 和 仅高浓度 组显著下调; 和 则呈现出一种波动上调 (CYP19a1则在0.5mg/L时显著上调,E2在0.01mg/L、0.25mg/L和2.0mg/L时 I 摘要 显著上调 。 (3 高浓度ATZ 能够对斑马鱼精巢的发育产生一定的影响。高浓度ATZ 使精巢发育相关基因sox9a显著下调,精原细胞数量略有减少,精巢的精小管结 构也出现了可见的显著病变,主要是精小管管间间隙增加;而除了0.01mg/L 的 各浓度组Dmrt1 基因均显著下调,但精巢组织却没有观察到可见的显著病变, 可能是这种转录水平的改变还处于HPG轴的调控范围内。 因此本研究认为:(1)ATZ能够对内分泌产生干扰,在低浓度时诱导雌激素 效应,上调VTG基因的表达,并呈现一种非单调的浓度效应关系。(2)ATZ引起 雄性类固醇合成相关基因表达下调,E2 的波动性上调,但是仅高浓度ATZ 降低 T 11-KT 雄激素水平,导致精巢中性激素的失衡,稍低浓度组 和 水平没有发生 变化。可能是由于ATZ影响雄性激素的代谢,引起性激素失衡,从而启动了HPG 轴的负反馈调节,下调雄性类固醇合成相关基因的表达。(3)ATZ下调精巢发育 相关基因的表达,但是仅高浓度ATZ对精巢组织产生可见的显著病变,可能是 因为转录水平的改变尚处于可调控的范围内。但是ATZ可能的作用机制还有

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