细菌及其病毒的遗传作图.ppt

1、为什么不少生物学家认为病毒不是生物？为什么病毒在遗传学研究中具有重要作用？ 2、名词解释：着丝粒作图、质粒、F因子、F+菌株、F-菌株、Hfr菌株、性导、列性噬菌体、温和噬菌体、原噬菌体、溶源性细菌、转导、普遍性转导、局限性转导 ■中断杂交实验绘图 为了证明接合时遗传物质从供体到受体细胞的转移是直线式进行的，Jacob和Wollman在五十年代设计了一个著名的中断杂交试验 1961年 Jacob 和 Wollman 供体HfrH ：strs thr＋leu＋azir tonr lac＋ gal＋ 受体F－ ：strr thr－leu－azis tons lac－gal－ 操作方法：37℃混合培养 每隔一段时间取样 搅拌器中断杂交 涂布含链霉素的基本筛选培养基 影印培养于含链霉素的几种不同的培养基（选择培养基）上 观察重组子 鉴定各基因的转移时间 HfrH菌株各非选择标记基因进入F－细菌的时间和频率 　以基因出现的时间为标准，作出E. coli的遗传连锁图 用中断杂交法确定的几个Hfr菌株的基因顺序 结论：不同Hfr菌株向F－细胞转移的顺序、起点和方向不同。表明大肠杆菌的染色体是环状的。 细菌的基本形态 细菌的结构模式图 二、细菌染色体 结构:环状双链DNA，单倍性，以折叠或螺旋状态存在； 大小：长约250-35000?m(未螺旋)； 复制方式：着膜式复制。 分裂特点：均等分裂，无基因重组。 E.Coli 的拟核 三、细菌遗传研究的方法 ★基本培养基（minimal medium） ★完全培养基（complete medium） 细菌的平板培养 细菌的稀释培养及菌落 影印培养法 四、细菌的突变型 ★合成代谢功能的突变型:（营养缺陷型） ★分解代谢功能的突变型： ★抗药性突变型: 青霉素: penr, pens 链霉素: strr, strs penicillin Streptomycin 抗性: resistance 敏感: sensitive ★抗噬菌体突变型 T1噬菌体 Tonr Tons T2噬菌体 Ttor Ttos 突变型的筛选 例如： 营养缺陷型的筛选: u.v ? 野生型细菌 ? 完全培养基： ?影印培养 基本培养基： ? 补充培养基 ： 氨基酸类 维生素类 ? 系列氨基酸 补充培养基：赖氨酸 脯氨酸 精氨酸…. 接合 转化 性导 转导与细菌染色体作图 第四节 细菌的染色体作图 一、接合 ★接合现象的发现 1946年Lederberg和Tatum用E.coli K12品系中两个菌株A和B做了一个 杂交实验首先证明了E.coli的有性生殖和基因重组。 A：met－hio－thr＋leu＋thi＋ 甲硫氨酸、生物素、 B：met＋hio＋thr－leu－thi－ 苏氨酸、色氨酸、硫胺素 A与B在基本培养基上都不能生长，A+B混合培养在完全培养基上过夜，然后把混合物离心、洗去培养基，涂布在基本培养基上，长出了菌落，是野生型。 黎德伯格和塔特姆的接合(杂交) 推测 有四 种可 能： 1、营养上的互补 2、A与B发生杂交 3、一个菌株的突变型基因发生了回复突变 4、细菌细胞没有接合，而是交换了DNA 1950年，Davis设计了U形管代谢产物互补实验，证明了A与B是通过接合传递遗传物质的。细菌之间通过杂交，发生了基因的重组和交换。 DNA大分子能通过 没有出现 A菌株 Met-bio-thr+leu+ B菌株 Met+bio+thr-leu- 说明什么? Met+bio+thr+leu+ 在任何一臂内都没有出现原养型细菌。这说明两个菌株间的直接接触--接合，是原养型细胞出现的必要条件。 Hayes（1952)试验证明，在接合过程中遗传物质的交换是一种单向的转移： 供体（雄性）→ 受体（雌性） Heyes实验 met－hio－thr＋leu＋thi＋ × met＋hio＋thr－leu－thi－ A菌株 B菌株 基本培养基上有菌落出现 （2）链霉素处理A再与B杂交，在基本培养基上有菌落出现 （3）链霉素处理B再与A杂交，在基本培养基上无菌落出现。 说明：遗传物质在大肠杆菌中的传递