猪传染病诊断技术进展.ppt

30年来我国猪病发展变化与根治展望 何启盖 教授，陈焕春 院士 华中农业大学动物医学院 武汉，430070 取得的成绩 感谢几代兽医科学家的努力，提高了我国动物疾病控制水平 疫苗：我国生物制品数量达到200多种，其中某些弱毒疫苗达到了世界先进水平。 猪伪狂犬基因缺失疫苗，猪大肠杆菌病的基因工程疫苗已开始推广应用。 一批简便适用的诊断试剂研制成功 促进了养猪业的健康发展 主要内容 1、近年来我国猪病发展变化 多病原混合感染 病原毒力增强 疾病种类增加：老病没有消灭，新病增加 2、根治展望 消费者因素；养猪企业自身需求； 兽医生物制品研发技术的进步； 国际交流；法律法规保障 一、猪病发展变化 1、单纯感染向多病原混合感染发展 细菌之间： 波氏杆菌－产毒性巴氏杆菌 病毒之间： 猪瘟－伪狂犬病毒混合感染 细菌－病毒： 猪繁殖与呼吸障碍综合征病毒 + 副猪嗜血杆菌 / 胸膜肺炎放线杆菌 / 链球菌 可能存在的原因 A. 免疫抑制疾病： 伪狂犬病 / 蓝耳病 / 圆环病毒.... 破坏淋巴细胞,降低免疫力，使继发感染容易发生 B. 病原之间相互作用 PRRSV + 细菌毒素 C. 使用霉变饲料 （2）病原毒力发生变异或增强 圆环病毒: PCV2b的毒力大于PCV2a 原因：在PCV2a基因组的1042核甘酸发生胸苷激酶 ( Thymidine, T)的缺失即为PCV2b。 猪呼吸与繁殖障碍综合征病毒 Nsp2基因的部分缺失 ORF5基因糖基化位点的增加 （3）疾病种类增加 老病得到有效控制 猪瘟 猪丹毒，黄白痢（大肠杆菌） 猪肺疫，仔猪副伤寒 伪狂犬病 新病增加 传染性胸膜肺炎 副猪嗜血杆菌病 蓝耳病， 圆环病毒….. 二、猪病根治展望 (1) 公众因素: 消费者食品安全的需求对猪病控制提出了更高的要求; 药物残留 人兽共患病病原: 链球菌2型;乙型脑炎 (2) 企业内部因素: 经济效益的驱动，使猪病控制成为企业自身的追求； (3) 高效疫苗的研发和使用 常规疫苗的改进 猪瘟疫苗: 细胞疫苗和脾淋苗,提高免疫剂量. 口蹄疫双价苗: 传染性胃肠炎-流行性腹泻双价苗 多血清型病原所致疾病 传染性胸膜肺炎三价疫苗(血清型1,2,7) 副猪嗜血杆菌双价疫苗(血清4和5型) 猪链球菌灭活疫苗 基因(缺失)工程疫苗 伪狂犬病基因缺失疫苗 以该疫苗株为活载体构建的多价基因工程疫苗 伪狂犬病+乙型脑炎 细小病毒 口蹄疫(VP1) 蓝耳病 细菌基因工程疫苗 胸膜肺炎放线杆菌弱毒疫苗 以此疫苗株为载体的呼吸道疾病多价基因工程疫苗 沙门氏菌为载体的预防腹泻疾病的多价疫苗 (4)诊断技术进展 明确所发生的疾病 种类：传染性因素：细菌、病毒、支原体、其它微生物； 非传染性因素 单纯感染 /混合感染 是否为人兽共患病 利于制定及时合理的控制方案 诊断方法包含: 流行病学方法 病理组织观察 血清学检测 病原学检测 分子生物学检测 抗体检测方法－血清学 凝集性反应 沉淀性反应 标记抗体技术 有补体参与的反应 中和反应 检测的目的 免疫状况评估： 定性或定量测定免疫抗体水平 诊断疾病： 区分疫苗免疫动物和自然感染动物； 常用的诊断方法 快速诊断：适用于个体诊断 平板凝集试验： 乳胶凝集试验： 免疫胶体金技术 大量样品筛选： 酶联免疫吸附试验（ELISA） 平板凝集试验 培养的菌体灭活后直接与血清混合，观察是否出现凝集颗粒，判定阴阳性。 乳胶颗粒（不同直径大小） 乳胶凝集试验 病毒或蛋白致敏乳胶颗粒，制备成诊断抗原 现场圈舍旁边检测抗体，主要是检测IgM，使用于感染早期诊断