重组腺病毒ADV-TK基因的构建及其对肝癌细胞的杀伤作用.pdf

2010;30(8) 南 方 医 科 大 学 学 报 (JSouthMedUniv) 窑1887窑 重组腺病毒ADV-TK基因的构建及其对肝癌细胞的杀伤作用 陈耿臻袁韩 慧袁许铭炎袁邓小玲渊汕头大学医学院第二附属医院外三科袁广东 汕头 515041冤 摘要院目的探 讨含 胸 苷 激 酶 渊TK冤自 杀 基 因 的 重 组 腺 病 毒 渊ADV-TK冤对 肝 癌 细 胞 的 杀 伤 作 用 遥 方法采 用 细 胞 内 同 源 重 组 法 构 建 出 携 带 TK基 因 的 ADV-TK袁经 PCR鉴 定 正 确 后 进 行 扩 增 尧纯 化 和 滴 度 测 定 袁将 ADV-TK感 染 人 肝 癌 细 胞 株 SMMC-7721袁MTT法 检 测 受 感 染 的 SMMC-7721细 胞 被 不 同 浓 度 GCV作 用 后 的 细 胞 存 活 率 情 况 遥结果构 建 的 重 组 腺 病 毒 中 带 有 TK基 因 袁 用 相 同 滴 度 的 重 组 腺 病 毒 和 不 同 浓 度 的 GCV作 用 于 肝 癌 细 胞 株 SMMC-7721后 袁MTT 法 检 测 到 细 胞 的 存 活 率 随 着 GCV浓 度 的 增 加 而 不 断 降 低 遥结论本 实 验 构 建 的 携 带 TK基 因 的 复 制 缺 陷 型 腺 病 毒 对 肝 癌 细 胞 具 有 明 显 的 杀 伤 作 用 遥 关键词院肝 癌 曰基 因 治 疗 曰胸 苷 激 酶 基 因 曰腺 病 毒 载 体 中图分类号院R392 文献标识码院A 文章编号院1673-4254(2010)08-1887-03 Construction of recombinant adenovirus containing TK gene and its effect against human livercancercells CHENGeng-zhen,HUHui,XUMing-yan,DENGXiao-ling ThirdDepartmentofSurgery,SecondAffiliatedHospital,ShantouUniversityMedicalCollege,Shantou515041,China Abstract: ObjectiveToconstructareplication-defectiveadenoviruscontainingTKgeneandinvestigatethekillingeffectsof TKgeneagainsthumanlivercancercellsSMMC-7721. Methods TherecombinantadenovirusADV-TKwasconstructed usinghomologousrecombinationinthecells. SMMC-7721cellstransfectedwithrecombinedadenoviruswereexposedto GCV, andthecellviabilitywasmeasuredbyMTTassays. Results TherecombinantadenoviruscontainingTKgenewas successfullyconstructed. TransfectionbytherecombinantadenovirusADV-TKandGCVexposuresignificantlysuppressed thegrowthofSMMC-7721cells. ConclusionAreplication-defectiveadenoviruscontainingTKgenehasbeensuccessfully constructed, and in combination with GCV, the recombinant adenovirus produces significant killing effect against SMMC-7721cells invitr