抗VEGF单抗联合紫杉醇对粘液表皮样癌、腺样囊性癌影响的实验研究.pptVIP

二、研究目的 通过粘液表皮样癌及腺样囊性癌裸鼠成瘤，观测抗VEGF单克隆抗体及紫杉醇对粘液表皮样癌和腺样囊性癌的生物学影响机制及治疗作用。寻求治疗粘液表皮样癌及腺样囊性癌的治疗方法，为临床治疗粘液表皮样癌及腺样囊性癌提供理论依据。 三、技术路线 组别 给药类型 组I 生理盐水 组II 抗VEGF单抗 组III 紫杉醇 组IV 抗VEGF单抗+紫杉醇 裸鼠种植模型 计算抑瘤率 TUNEL技术检测凋亡 肿瘤微血管测定 四、预期成果 探明抗VEGF单克隆抗体及紫杉醇对粘液表皮样癌和腺样囊性癌的生物学影响机制及治疗作用，并获得相关实验数据。 发表文章1篇。 建立动物模型 观察小鼠肿瘤指标 TUNEL技术检测肿瘤细胞凋亡 肿瘤内部微血管的测定 五、实验内容 动物及细胞来源 BALB/c小鼠向生物公司购买。 细胞来源有两类: 1. 直接来自人原发肿瘤组织，由临床进行收集。 2. 来自于传代的细胞。Mec 及本实验室的传代细胞 建立动物模型 BALB/c小鼠分别于右腋皮下接种粘液表皮样癌细胞及腺样囊性癌细胞。接种成功后每种肿瘤各40只小鼠（共80只）将两种小鼠各随机分为4组（共八组）。 组别 N（只） 给药物种类 剂量 给药途径，时间 组I 10 生理盐水 0.2mL 腹腔注射，接种后第7－9天，1次/天 组II 10 抗VEGF单抗 200μg /0.2mL 腹腔注射，接种后第7－9天，1次/天 组III 10 紫杉醇 0.3 mg/0.2mL 腹腔注射，接种后第10－12天，1次/天 组IV 10 抗VEGF单抗+紫杉醇 200μg/0.2mL抗VEGF单抗 +0.3 mg/0.2mL紫杉醇 第7－9天注射抗VEGF单抗， 接种后第10－12天注射紫杉醇，余同上 观察小鼠肿瘤指标 1.当肿瘤可触及，肿瘤旁边置5㎜不锈钢消毒标尺后采集图像，1次/2天，用Image Pro Plus 6.0(IPP6.0)图像分析软件测出肿瘤的短径和长径，根据体积计算方法＝（短径2×长径2)×0.5，取平均值描绘肿瘤生长曲线。 2.　　处死裸鼠, 剥离肿瘤称质量，根据以下公式计算抑瘤率。 　　 生理盐水组平均瘤重（㎎）－实验组平均瘤重（㎎） 抑瘤率(%) = ×100%. 　 生理盐水组平均瘤重（㎎） TUNEL技术检测肿瘤细胞凋亡 石蜡切片 脱蜡、水化 阻断内源性过氧化物酶 暴露、修复抗原 显色，复染，脱水，透明，封片。 光镜观察，采集图像。 IPP 6.0 处死小鼠 切除肿瘤 肿瘤内部微血管的测定 石蜡切片 脱蜡、水化 CD31染色、标记肿瘤内部血管 计数热区内的微血管数。 IPP 6.0 处死小鼠 切除肿瘤 显色，复染，脱水，透明，封片。 选择血管生成热区（hot spot） 通过MVC得到微血管的密度 六、可行性分析 1.技术力量保障：实验技术问题有实验室老师指导进行，本实验所涉及的实验方法和实验技术在国内外均是成熟可靠的。 2. 硬件设施：口腔实验室拥有本实验所需的科研仪器设备，所需动物、试剂等国内外均可购得。 七、计划安排： 2013年4月-6月： 实验准备阶段（收集临床标本、订购实验材料、动物、试剂等） 2013年6月-2013年11月：裸鼠成瘤，建立动物模型、观察小鼠肿瘤指标 、检测肿瘤细胞凋亡、肿瘤内部微血管的测定 2013年11月-2014年3月：整理实验数据资料、撰写论文和总结汇报 八、研究经费 1. 实验动物及饲养费：约6000元 2. 材料及试剂：约8000元 3. 切片制作及检测：约4000元 4. 文章发表和论文装订：1500元 谢谢 WPS Office Make Presentation much more fun @WPS官方微博 @kings