干细胞移植治疗心血管疾病临床前研究及规范探讨.pdfVIP

会议论．3巳zlL． 干细胞移植治疗心血管疾病临床前研究及规范探讨 沈振亚 (苏州大学附属第一医院) 传统观点认为，心肌受损后，心肌细胞不能再生，只能被疤痕组织代替。由于分裂增生的细胞数量 少，修复能力有限，药物、介人和手术等传统治疗方法，均不能代替坏死心肌。因此，干细胞移植，这一旨 在增加心肌细胞数目，改善心肌收缩舒张功能，达到治疗心血管疾病目的的方法，成了研究热点。 干细胞移植与分化机制方面尚未取得一致的观点，通常认为干细胞移植可以增加细胞因子如 VEGF的释放，促进缺血区域新生血管的形成，改善灌注和心肌功能，减少心室扩张及重构，移植的干细 胞在局部微环境的诱导下可以分化为心肌细胞、血管内皮细胞、平滑肌细胞等，即具有可塑性。 自2002年干细胞移植治疗缺血性心脏病技术应用于临床研究以来，包括骨骼肌成肌细胞、骨髓单 个核细胞、骨髓间充质细胞、内皮祖细胞、ACl33+细胞、外周血干细胞以及联合细胞因子动员进行了许 多临床实验。骨髓干细胞因其不存在免疫排斥反应问题，采取方便，被认为是最有希望的细胞移植类 型。 目前国内的干细胞再生研究跟国际接轨，已发展到临床前研究阶段，为了规范干细胞技术的应用。 2009年3月2日，卫生部颁布了《医疗技术临床应用管理办法》，将自体干细胞和免疫细胞治疗技术、异 基因干细胞移植技术纳入第三类医疗技术管理。4月30日，卫生部科教司召开细胞治疗技术临床研究 管理工作研讨会，研究加强细胞治疗临床研究管理工作措施。本文拟对目前骨髓干细胞移植临床前研 究的几个热点问题进行概述，以对干细胞治疗心血管疾病的治疗规范进行探讨。 一、移植干细胞的种类 目前用于移植研究的骨髓干细胞种类主要包括混合成分的骨髓单个核细胞、单一成分的骨髓干细 胞群和诱导分化后的骨髓干细胞。 骨髓单个核细胞包括了骨髓间充质干细胞、内皮前体细胞、造血前体细胞和许多其他的细胞亚群如 单核细胞、纤维母细胞、血管内皮细胞和脂肪细胞等。单个核细胞移植是目前国内临床上应用较多而且 相对简单的移植方式。这种移植方式不仅省略了体外培养这一环节，能够紧急使用。且可以认为多种 细胞成分移植后，能为移植细胞向心肌细胞、血管内皮细胞、平滑肌细胞诱导分化提供了一个相互依赖、 相互作用的良好的诱导分化微环境。但是，单个核细胞移植细胞总数虽然较大，但造血干细胞、间充质 干细胞等有效细胞绝对量却很少，难以获得治疗效果。因此，单个核细胞移植疗效可能比较低下。 单一细胞成分移植即采用免疫学方法分离出单一的细胞成分或通过体外培养提纯后再进行自体移 植。据报道将CDl33+的内皮前体细胞自体移植后患者缺血心肌的血液灌注明显改，用免疫学方法分 离的造血干细胞移植后在心肌微环境的作用下能够转化为心肌细胞而体外培养提纯则由于正常生理条 件下骨髓中造血干细胞、间充质干细胞和内皮前体细胞含量均很少，通过体外培养扩增，可使细胞数量 呈指数增加，从而达到提纯的目的。单一细胞成分培养的疗效报道不尽相同。目前趋向于认为并非间 充质干细胞等有效细胞成分可转变为心肌细胞和内皮细胞等导致心脏功能改善，而是其本身能够缓解 心肌细胞凋亡和心室重构，提高宿主心肌细胞的收缩性，井由于表达VEGF等生长因子而促进血管增 生，改善缺血心肌的血液灌注。 有报道指出。经过5一氮胞苷(5．啪)诱导后的骨髓间充质干细胞，能在瘢痕组织中转化为心肌细胞， 并形成缝隙连接，和宿主心肌细胞同步搏动，此种方法疗效肯定，只是工作比较繁琐，条件控制比较严 格。且目前尚无一种提高诱导效率的全新方法，诱导转化率仅有加％，诱导后的干细胞移植是否会增 棠议论文j‘ ·I83· 加心律失常发生的可能性也不明确。故此类细胞移植多处在基础研究的阶段。 就骨髓干细胞来说，是选择骨髓单个核细胞、问充质干细胞，还是定向诱导后的成熟细胞，抑或是 处于这些细胞之间的祖细胞来进行移植；是直接移植骨髓间充质细胞，还是先在体外诱导分化出心肌 细胞后再进行移植尚无定论。目前用于临床移植研究的细胞主要为自体骨髓单个核细胞移植、骨髓间 充质细胞和内皮祖细胞。但大部分研究者愈来愈集中于骨髓间充质干细胞，在现有条件下采用骨髓间 充质干细