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体外构建骨微构组织的研究 陈霡沁, 叶朝阳，周 燕, 谭文松 (华东理工大学, 生物反应器工程国家重点实验室, 上海 200237) 摘要：模拟组织发育过程中自组装的内在特质采用模块化方式体外构建大型工程化组织是目前组织工程领 域中新兴的研究方向。本实验将羊膜间充质干细胞接种到Cultispher S 微载体上，采用细胞增殖和成骨诱 导两步法，通过考察骨微构组织制备过程中细胞增殖、细胞分布、成骨分化及微构组织自发聚集，最终形 成具有与天然组织相似的骨微构组织。该微构组织呈现良好的细胞活性和丰富的胞外基质，细胞分布均匀 且无明显坏死区，诱导后能表达Ⅰ型胶原和骨钙素等成骨分化相关基因，碱性磷酸酶活性和钙剂质沉积随 诱导时间延长而增加，表明，基于微载体和间充质干细胞可成功制备骨微构组织。本研究为体外进一步采 用模块化方式构建工程化大型骨组织奠定了基础。 关键词：骨组织工程；微构组织；间充质干细胞；成骨分化 Fabricatoin of Bone Microtissues in vitro Mai-Qin Chen, Zhao-Yang Ye, Yan Zhou and Wen-Song Tan （State Key Laboratory of Bioreactor Engineering, East China University of Science and Technology, Shanghai 200237, China) Abstract ：Recently, tissue engineering via modular microtissues holds great promise for engineering tissue constructs with large dimensions. Here, we investigated the feasibility of using Cultispher S microcarriers seeded with hAMSCs to fabricate bone microtissues ，via two-step way, which including cell proliferation and osteogenesis. Microcarriers were found to assemble into small aggregates with homogenous cellularity and abundant ECM production and most importantly, conductive to osteogenic differentiation of seeded hAMSCs. Our results provide promising basis to engineer bone tissue replacements with large dimensions ex vivo in future. Key words ：Bone tissue engineering ；microcarriers ；mesenchymal stem cells, osteogenesis 引 言 骨缺损是骨科常见病，临床上通常采用自体骨移植、同种异体骨移植、带血供的游离骨 移植和生物材料替代等方法进行治疗，但这些方法普遍存在供体来源少、并发症多、免疫排 斥和医源性感染等诸多问题[1] 。近年来，人们开始运用组织工程的方法来进行骨缺损的修复， 特别是针对骨不连骨缺损（如内径大于5 mm的大块骨缺损）的填充和愈合这一临床难题， 寻求有效的治疗方法[2,3] 。 传统的骨组织构建大多在尺寸大于1 mm的材料上接种细胞并进行培养，通过细胞增殖 和诱导分化，最终获得具有活性细胞和胞外基质的组织构建物。但构建过程中，随着支架尺 联系人：周燕，电话：021E-mail: zhouyan@ecust.edu.cn. 第一作者：陈霡沁（1983-）， 女，博士研究生。 寸的增加、细胞增殖和胞外基质分泌，包括氧在内的物质传递限制逐渐增大，使