禽流感转基因植物可饲用疫苗的研究.pdfVIP

新型疫苗研发及基因工程疫苗应用研讨会 禽流感转基因植物可饲用疫苗的研究 郭倩倩1姜三杰’梁哲。 张占路2侯学瑛2唐益雄1吴燕民卜 (’中国农业科学院生物技术研究所，北京， 10008l；2深圳市农科集团公司，深圳，518040) 摘要：【目的】利用豆科牧草作为植物生物反应器来生产禽流感抗原蛋白，研究提高抗原蛋白 表达餐的方法。【方法】构建含高效表达元件MAR序列的植物高效表达载体和含引导肽KDEL的融合 表达载体，以百脉根的子叶作为外植体，通过农杆菌介导法，将禽流感血凝素基因导入到了豆科牧 草推J．．品种白．脉根“里奥”中，经过抗性筛选，获得了抗性植株，对抗性植株进行RT—PcR、Southe功 B10t、western Blot等检测分析。【结果】检测结果表明禽流感血凝素基因已成功在百脉根中表达。 而通过荧光共聚焦显微镜观察洲A-GFP的表达结果发现KDEL并未和预想的一样起到将目的蛋白定位 到内质网的作用，而是定位到了细胞膜和细胞间隙。【结论】利用豆科牧草作为植物生物反应器来生 产禽流感抗原蛋白是切实可行的。同时发现禽流感血凝素基因(HA)本身可能存在着引导蛋白到细 胞膜和细胞间隙的序列。HA有很强的定位作用目前还没有报道，尚属首次发现。禽流感血凝素基因 在细胞膜及细胞间隙的表达，将为抗原蛋白的纯化提供了可能。 关键词：禽流感血凝素GFP百脉根转基因 Avian StudvontheProductionofVaccinefor influenzaVirus in Plants Transgenic GU0 LIANGZhe‘ZHANGZhan—lu‘HOU Qian—qian。JIA}岷San—jie‘ Xue—yingz TANGYi—xionwUYanlnin” gj Insti of Research (1Biotechn0109ytute，ChineseAcademyAgricultural Shenzhen 100081：‘ShenzhenNongkeGroupCorporation， 518040) Abstract： as bioreactor useda to the ：【Objective】Legumeforage_ras plant produce H5N1 1nthe themethodfor the antigenprotein． study，霄eexplored improvingexpression levelofH5N1ant 【Method】0neeffective vectorswith igenprotein． high plantexpression MAR andonefusion vector霄ithKDEL wereconstructed sequence expression targetingsequence recombination transformedinto三Dr￡，scDr77jc￡，，a芒￡，The