口蹄疫三价重组鸡痘病毒疫苗免疫原性研究.pdfVIP

猪的传染病一猪口蹄疫 口蹄疫三价重组鸡痘病毒疫苗免疫原性研究 马呜潇1金宁一2‘尹革芬3鲁会军2李昌2田明尧2李霄金明兰21 1辽宁医学员畜牧兽医学院锦州12100l 2中国人民解放军军事医学科学院全军基因工程重点实验室长春130062 3云南农业大学动物科技学院65020l 摘要本研究通过小鼠免疫试验，对本室已经筛选到的共表达O型、A型和AsiaI型FMDV复合多表位免疫原基因 重组鸡痘病毒vuTA．ILl8一oAAT能有效激发机体的细胞和体液免疫反应．与阴性对照组相比，T细胞亚类数量、cTL 杀伤活性，抗。型、A型和Asial型FMDv的特异性抗体水平差异显著。 关奠词 重组鸡痘病毒；口蹄疫病毒；vulA—m18．oAAT；免疫原性 diseasevims，FMDV) 口蹄疫(foot—aIld．mouthdisease，FMD)是由口蹄疫病毒(foot—and—mouth 感染引起的一种急性、高度接触性人畜共患传染病。该病传播速度快、感染率高，是危害养殖业的 烈性传染病之一，世界各国都十分蕈视。虽然口蹄疫在tH=界许多个国家已经被消灭或很好地被控制 了，然而在近几年内，口蹄疫再度给养殖业带来巨大的经济损失。如1997年我国台湾省的一次大暴 发，殃及600多个猪场，2000年在俄罗斯、韩国的暴发也造成了巨大的经济损失，特别是2001年2 月开始在英国的那次暴发和流行，给英国养殖业造成了继疯牛病和猪瘟两大痰隋损害后的又一次沉 新疆、甘肃、北京、河南等地爆发了AsiaI型刚D，而且与云南曾经发生的AsiaI型蹦DV相比， 属于不同的基因型。 vims，FPv)是在痘苗病毒的启发下以其独特优点逐渐发展起来的新一代痘 鸡痘病毒(FowIpox 病毒载体。尽管FPV能有效感染一些哺乳动物细胞，但主要只表达早期基冈，不能发育成成熟的病 毒粒子，即一过性感染或流产性感染。因而决定了鸡痘病毒可以作为非复制型载体广泛应用于哺乳 动物。本实验室用自主构建的鸡痘病毒表达载体，已成功地表达了mV HN、 gag、mvgpl20、NDv NDV F等基因，表达产物均有较好的免疫原性。 vimse 的重组鸡痘病毒(Recombinantfowlpox RFPV)重组基础上…，对其免疫原性进行了研究。。 以期研制出适合我国国情的廉价、高效、多价的新型FMDv疫苗，为有效控制乃至最终消灭刚DV 提供物质储备。 1材料与方法 1．1重组鸡痘病毒、真核表达质粒和ELIsA抗原 vIJTA—ILl8—oAAr。 分别含有O型、A型n伍}v pⅨSplay-mⅥ)(A)和pDisplay-mⅥ’(Asial)。 大肠杆菌分别表达的O型、AsiaI型和A型n仍V的Ⅵ，l重组蛋白，作为EUSA检测抗原。 1．2检测试剂盒 96@Non—Radioactive 细胞毒分析试剂盒(CytoTox Cytotoxic埘Assayl(it)为ProrIlega公司产品。 1．3实验动物 36只6—8周龄BALB／c小鼠，18．209，购白军事医学科院实验动物中心。 meNalional863 of DoctorFoundadonof supponedby ProjectCmna(No．2006AAl0A204)卸d LiaoIlillgpmvince(No． 200810991 Au廿10r ·c伽髓pondenceEmail：ningyij@yalloo．com；nn)【x8@yatloo．com．cn 588 第十三次学术研讨会会议论文集 1．4小