REACH法规 第四卷译稿-41.docVIP

B.41. 光毒性－体外 3T3 NRU光毒性测定 光毒性测定 1. 方法 1.1. 引言 光毒性被定义为一种毒性反应，它是有皮肤在接触某种化学物质及并发的光线后产生的，或者是在一种化学物质射线的诱导下产生。 从体外3T3NRU光线损害测定中得出的信息，可用于识别测定物质的光学毒性，即测定当测定物质接触于紫外光和可见光下时发生危险的可能性。 由于在体外3T3NRU 光线损害测定中毒物学的终点决定了化学物质和光共同作用而产生的光线损害，整体的分布和应用于皮肤的具有活体光学毒性的化合物以及在局部应用于皮肤的光学辐射之后的化合物可以被测定出。 体外3T3NRU光线损害测定是在1992-1997年联合的EU/COLIPA （1）（2）（3）中开发和生效的，其目的在于建立一个合法的项目以替代目前使用的各种各样的活性测定。1996年，OECD工作组推荐了一种用于光线损害度评估的活性测定(4)。 来自体外3T3 NRU 光线损害测定的结果与在动物/人身上的敏锐的光线损害/光学辐射作用相比较时，其表现出了很好的对这些作用的预期指示性。这一测定并不是设计用来预测其他来自化学物质和光线共同作用而产生的相反的作用。例如，磷光光线损害、光变反应和光致癌,尽管许多表现出以上特殊性质的化学物质将在体外 3T3 NRU 光线损害测定中发生正反应。此外，该测定也不能用于光学毒性效力的评估。 在附录1种已给出一个相继产生的测定光线损害的化学物质的方法。 1.2. 定义 辐照度: 紫外线或可见光在一表面上的强度，用W/m2或 mW/cm2度量。 光的剂量: 紫外线或可见光在一表面上伴随产生的量（强度*时间），用焦耳/米2或焦耳/厘米2表示。 紫外线光波段: CIE 推荐的名称为 UVA(315-400 nm)，UVB(280-315 nm) 和 UVC (100- 280 nm). 也常使用其他一些名称：UVB和UVA的分界线常置于320纳米，UVA可被分为UV-A1和UV-A2其分界线大约在340纳米。 细胞存活率: 测量一细胞总活性的参数 (例如.将关键的染料移入细胞的溶酶体中)，其决定于测量的终点和所用的设计方案，并且与细胞总数和存活率相关联。 相对细胞存活率:即在与整个实验步骤中所用的阴性对照组相关的，但不处理测定物质的细胞存活率。 预测模型: 一个用于将毒性测定结果变异为对毒性能力的预测。在现有的测定方针中PIF 和 MPE 可用于将体外 3T3 NRU 光线损害测定的结果变异为对该物质光线损害能力的预测。 PIF:(光刺激因素) 一个由对测定化学物质两个等价的效力的细胞毒素的浓缩物的比较而引发的因素，所用测定化学物质置于（+UV）和无细胞毒性的UVA/vis 光的辐射下。 MPE:( 光方法作用) 但（+UV）和无细胞毒素的UVA/vis 光的辐射下，我们发现了一种新的测量方法。在上述条件下，对两个浓缩物的反应曲线完整形状的数学分析。 光线损害: 皮肤在某种化学物质下第一次接触，随后，在光线下接触时被激发的毒性反应；或者是皮肤在一种化学物质的监控下，发生的放射现象。 光刺激: 术语 光线损害 的子种,仅用于描述当皮肤局部接触于化学物质时产生的光学毒性反应。这些光学毒性反应常常导致对细胞不确定的损害（如太阳光的灼伤）。 光过敏: 一种后获得的免疫的活动能力；该能力的活得在皮肤第一次接触于化学物质和光线时不能产生，它需要一到两个星期的诱导时期。 光神经毒性: 在基因终端发生的基因毒性反应；这种反应是在细胞接触于无基因毒性剂量的紫外或可见光和无机印度星化学物质时引导产生的。 光致癌性:由于重复使用光线照射和化学物质而诱发的光学致癌性。术语 ‘co-carcinogenesis一次用于当紫外光诱发的肿瘤遇化学物质进一步恶化时。 1.3. 参考物质 除了应在每一测定中测定的阳性对照组物质氯丙嗪之外，对在新建立的3T3 NRU 光线损害测定中，人们建议把实验室内关于目前测定用到的化学物质中的一部分作为参考物质（1）（3）（13）。 1.4. 开始的考虑 据实验结果报告，许多类型的化学物质都能诱导光学毒性效应(5)(6)(7)(8).它们唯一的共性，即是它们在太阳光区域内吸收光能的能力。依照光化学 (Grotthaus- Drapers 定律)光化反应需要吸收足够量的光子。因此，在考虑根据现有的实验方针作生物实验之前，应确定一个测定物质的紫外光吸收谱（例如，根据OEC实验方针101）如果摩尔猝灭/吸收率小于10升每摩尔每厘米，该化学物质无光反应能力，并不许作3T3 NRU 光线损害测定或其它任何测定相反光化学效应的生物实验（附录1）。 1.5. 测定方法原理 用来确定一种（化学物质）生色团吸收光的四种装置可导致光线损害反应（7）、它们会导致细胞损害。因此，在体外