正常人体细胞的染色体分带.pdfVIP

第3卷 第2期 遗 传 学 报 Vol.3.No.2 1976年 6月 ACTA GENETICA SINICA tune, 1976 正常人体细胞的染色体分带 中国医学科学院肿瘤研究所细胞生物组 用胰酶分带，获得了我国正常人体细胞染色体的G带图型，与第四届国际人类遗传学会所 提供的Q带和G带图型基本相似，从而作出正常人体细胞每对染色休的G带图样。讨论了胰 酶分带技术中必需注意的二个主要条件：染色体的长度和胰酶消化时间。根据现有资料简单 讨论了胰酶分带的作用机制。 自从1965年 Caspersson首次发现用荧光染料氮芥座叮因 q（uinacrinemustard简称 QM)染色，可将人体细胞染色体显示特殊的带型 简（称Q带图形），从而使每对染色体都 能一一加以辨认后，吸引了许多细胞遗传学者从事染色体分带方法的研究。如用座叮因 盐酸盐 q（uinacrinedihydrochoride）染色获得与QM相似的Q带图形；用碱、热、盐、尿素、 去污剂和各种溶蛋白酶处理染色体标本后经姬姆沙染色亦均可获得与Q带相似的G带图 形3-〔81因（均用Giemsa染色，故简称为G带图形）。 由下技术上的突破，人体细胞遗传学的研究进人了新的阶段。如纠正了根据 Denver 会议标准而确定了10年之久的慢性拉细胞白血病的Ph`染色体为21号染色体的错误。 1971年Caspersson用Q带方法证明Ph,染色体属22号，，〔，Rowley和Wang-Peng等用G 带方法证明Ph，染色体乃22号染色体的长臂丢失三分之二所形成，而且发现丢失部分易 位至C组第9号染色体的长臂远端110,111。上述例证充分说明分带技术的确使人类细胞遗 传学达到了一个新的水平。 1971年9月由美、英、法、瑞典等国参加的第四届国际人类遗传学会在巴黎召开后， 决定制订出一套人类染色休分带命名标准，以标明每对染色体的带型和分区，使人类细胞 遗传学的工作具有更精确的、统一的国际标准，以利于提高工作质量和相互交流川，。 国内虽有依据 Denver会议商定标准对正常中国人染色休进行测量和形态分析的详 尽报道[il但以当前采用的分带技术衡量，显然已不够精确，尤其对染色体易位和缺失的 辨认，标记染色体来源的分析都有困难。为使这方面的工作提高一步，便于同国内外的有 关资料进行比较和交流，我们试用了几种比较简单易行的分带技术，发现用Seabri沙t氏 的胰酶分带方法Cal，可得到优质的永久标本，便于分析和保存。兹将方法和结果介绍如下： 材 料 和 方 法 用正常人外周血培养法获得染色体中期相，为了适合分带的染色体长度的要求，将秋 水仙碱稀释成2y／ml，在制片前4-6小时加1滴至培养液中 相（当于1毫升培养液中含 0.02y的秋水仙碱），再经0.075多KCl溶液作低渗处理后，按常规制成染色体标本[21［0 染色体分带：采用Seabright氏的胰酶分带法，将3夭左右的新鲜染色体标本在室温 条件下置0.25多的等渗盐溶液的胰酶中消化5-15秒钟(2-3个月的标本可适当延长到 之期 中国医学科学院肿瘤研究所细胞生物组：正常人体细胞的染色体分带 151 10-15分钟），经姬姆沙染色后即得G带永久标本。 先在低倍镜下选择染色体氏度适中的分裂相，再于汕镜F选择带型清晰的标本，记 下座标，用油镜放大1,000倍作显微照相，放大印成 3X4时的染色体分带相片，按照 Dcnvcr标准及巴黎会议关于人类染色休分带命名标准进行染色体组型分析。 结 果 参考巴黎会议标准，我们分析了100个染色体中期相，得到每对染色体的带型与巴黎 会议记述的标准的Q带和G带图形基本一致的结果。其 ｝「、带型较完整、清晰的核型约占 40汤，按标准归丁_.1p型。带型较少、清晰度较差的核型约占60界，按标准归于“A”型fiat 见（图版1,11) 现以 “B,型特征为例，将每号染色体的带型分述如 氏 A组：No.lpi)：近着丝点处有2个着色中等的带，远端着色渐浅二