神经鞘磷脂合成酶2基因缺失可以减慢糖尿病进程.pdfVIP

摘 要 背景目的：糖尿病已经成为影响人们生活质量、健康乃至生命的三大疾病之一，其 发病机理主要是胰岛功能缺陷、胰岛素抵抗(Insulin resistance, IR)两方面的因素，但确切 的发病机制仍然不明确。随着研究的深入，相继发现神经鞘磷脂(Sphingomyelin，SM)， 及其前体神经酰胺，在IR 患者体内有所堆积。SM 是神经鞘磷脂合成酶(Sphingomyelin synthase, SMS)催化卵磷脂的磷酸胆碱转移到神经酰胺的羟基上生成的；SMS 是SM 从 头合成途径中关键的合酶，有SMS1 和SMS2 两个亚型；其中SMS2 是主要的合酶，被 定位在细胞膜上。本研究以神经鞘磷脂合成酶 2 基因敲除(Sphingomyelin synthase 2 knockout ，SMS2-/-) 鼠为研究对象，探讨神经鞘磷脂合成酶2 与糖尿病发生发展的关系。 实验方法：选择雄性，3个月龄 SMS2-/- 小鼠为实验组；雄性，3月龄 C57BL/6J (wild-type, WT)小鼠为对照组。两组小鼠高热量饲料喂养前后测体重、空腹血糖(Fasting plasma glucose,FPG) 、空腹胰岛素(Fasting insulin,Fins)和糖耐量。高热量饲料喂养3个月 后进行胰岛素释放试验（Insulin release test ，IRT ）和胰岛素耐量试验(Insulin tolerance test ,ITT) 。计算胰岛素抵抗指数，线性回归分析。最终处死小鼠取附睾脂肪石蜡切片， 经苏木精伊红染色显微成像后计算脂肪细胞表面积。 实验结果： 1. 体重：SMS2-/-组始终轻于WT 组；高热量饲料喂养时间越长，体重差异越大，第3 个月SMS2-/-组显著性低于WT 组[(30.95±1.7)g vs (34.45±2.5)g，p 0.05 ] 。 2. FPG ：WT 组高热量饲料喂养第2 个月时FPG 显著高于高热量饲料喂养前[(7.65±0.81) mmol·l-1 vs (6.06±0.55) mmol·l-1 ，p 0.05] ；SMS2-/- 组第3 个月时FPG 显著高于高热 量饲料喂养前[(6.87±1.44 ) mmol·l-1 vs (5.38±1.24) mmol·l-1 ，p 0.05] 。 3. Fins ：高热量饲料喂养3 个月后WT 组Fins 降低，而SMS2-/-组显著增高[(14.05±0.82) mu·l-1 vs (12.33±0.88) mu·l-1 ，p 0.01] 。 4. 胰岛素抵抗评估指数(HOMA-IR) ：WT 组高热量饲料喂养第2 个月HOMA-IR 显著 性高于高热量饲料喂养前[(4.11±0.50)vs(3.32±0.48)，p 0.05 ] 。高热量饲料喂养第3 个月SMS2-/-组HOMA-IR 显著性高于高热量饲料喂养前[(4.26±0.72)vs(2.95±0.74)， p 0.05] 。 I 5. 血浆SM：高热量饲料喂养3 个月SMS2-/-组显著性低于WT[(3.87±0.45)mg·dl-1vs (4.26±0.44)mg·dl-1 ，p 0.05 ] 。 6. ITT：胰岛素负荷后单位时间内血糖的代谢清除率SMS2-/-组是WT 组的1.31 倍， SMS2-/-组外周组织胰岛素敏感性高。 7. 糖耐量：高热量饲料喂养前，两组小鼠的糖耐量均正常。高热量饲料喂养3 个月后 WT 组糖负荷后2h 时血糖显著高于空腹时[(2.22±0.17)mmol·l-1 vs (1.86±0.22)mmol·l-1, p 0.05 ] ，糖耐量受损；SMS2-/-组糖负荷30min 血糖显著升高，2h 时血糖恢复至空 腹水平，糖耐量正常。 8. IRT：WT 组糖负荷1h 内未出现显著性胰岛素分泌高峰，胰岛素分泌异常；SMS2-/- 组糖负荷后15min 时胰岛素分泌降低，30-60min 平均增3.4%，说明后期胰岛素代偿 性分泌增多。 9. 线性回归分析：由回归方程可知WT 组和SMS2-/-组的血浆SM 浓度都显著影响糖负