酶解法提取杜仲籽壳中杜仲胶及桃叶珊瑚苷软膏的研究制备.pdfVIP

摘 要 摘 要 以杜仲翅果为研究对象，以蒽酮比色法测定酶解杜仲籽壳液中的总糖含量作 为考察指标，进行了复合酶1、复合酶2 及复合酶3 对杜仲籽壳酶解预处理提取杜 仲胶的工艺研究。从杜仲粕中提取出来的生物活性物质桃叶珊瑚苷，用酶部分水 解为桃叶珊瑚苷苷元，并将桃叶珊瑚苷及其苷元制备成软膏。本研究的主要内容 如下： （1）酶解法处理杜仲籽壳考察指标的研究 采用差示光度法（△A 法) ，以酶解液中的总糖含量来考察复合酶的酶解率。 消除了试样背景的干扰、与普通分光光度法(即用试剂空白)相比，吸收峰明显改善， 其吸收峰与葡萄糖对照品一致，重现性良好，且溶液中的酶不影响总糖含量的测 定。结果表明该方法可以间接表示杜仲籽壳中杜仲胶的提取情况。 （2 ）复合酶酶解法提取杜仲胶的工艺优化 采用蒽酮比色法测定酶解液中的总糖含量为考察指标，研究了复合酶 1 处理 杜仲籽壳的工艺，得较优工艺条件：水浴温度 50 ℃，pH 值 3.8 ，酶用量 3% ， 料液比1 ∶15 （g ∶ mL ），酶解2 次，每次3 h ；在此条件下，杜仲胶一次提取率 达到57.65%，是非酶解法的1.3 倍。复合酶2 的较优工艺：水浴温度50 ℃、pH 值 4.2 、酶用量 2.1 % 、料液比为1 ∶15 的，酶解2 次，每次3 h ；在此条件下， 杜仲胶一次提取率达到52.17%，是非酶解法的1.2 倍。复合酶3 的较优工艺：水 浴温度50 ℃、pH 值 5.4 、酶用量 1.5 % 、料液比为1 ∶15，酶解2 次，每次3 h ； 在此条件下，杜仲胶一次提取率达到49.65% ，是非酶解法的1.1 倍。 （3 ）桃叶珊瑚苷的提取纯化及软膏制备 在较优上样量 20 mg·g-1 及最适宜的洗脱液甲醇–氯仿–石油醚– 乙酸乙酯(4 ∶ 3 ∶2 ∶8 )条件下，桃叶珊瑚苷通过硅胶柱分离和重结晶纯化，得纯度为95.6%的产 品。在溶液pH 值5.1，酶解温度为37℃、酶解时间30 min，用β-葡萄糖苷酶处理 30 mg 桃叶珊瑚苷，使之部分水解，得到桃叶珊瑚苷及其苷元的混合物。采用如下 处方：石蜡4 g ，蜂醋1.5 g，苯甲酸0.01 g ，抗坏血酸（维生素C ）0.001 g ，白凡 士林4 g ，将桃叶珊瑚苷制备成油脂性软膏。软膏经稳定性试验表明，基质及桃叶 珊瑚苷及其苷元的性质均无变化，说明桃叶珊瑚苷软膏符合药物稳定性试验方法 中的加速试验要求，为临床应用奠定了基础。 主题词：杜仲籽壳，杜仲籽粕，酶解法，杜仲胶，桃叶珊瑚苷，软膏制备 第 i 页 ABSTRACT ABSTRACT Total sugars measured by anthrone colorimetry as index, enzymolysising technologies of complex enzyme1, complex enzyme 2 and complex enzyme 3 to the shell of eucommia ulmoide were investigated. Aucubin extracted from the shell of Eucommia ulmoide was zymohydrolysised by β-glucosidase. Part of Aucubin was degraded to Aucubigenin, then both of them were used to prepare ointment. The contents of this