禽传染性支气管炎病毒S1基因在毕赤酵母中表达的研究.pdfVIP

中国畜牧兽医学会动物微生态学分会第四届第九次学术研讨会论文集(下册)(2008年河南新乡) 禽传染性支气管炎病毒S1基因在毕赤酵母中表达的研究 余祖华1王红宁喀3 丁轲1 (1．河南科技大学动物科技学院河南洛阳4710032．四川农业大学大学动物科技学院四川雅安 加了终止密码子的IBVSI基因表达片段。用限制性内切酶SnaBI和Not I将s1基因和载体pPIC9K His+M甜．将重组菌株在1％的甲醇中进行 型筛选后，获得了整合型阳性重组菌株GSll5／pPIC9K．Sl 诱导分泌表达，并对表达产物进行SDS-RAGE、Westernblot分析，结果表明，mvsl基因在毕赤酵 母中成功获得了表达，表述蛋白的分子量约为76KD。能与IBV阳性血清特异性结合，表达的蛋白 占上清中总蛋白量的12．5％．本研究表达的IBVSl蛋白可作为制备毋诊断抗原、基因工程疫苗的 基础材料，对IB的诊断防治有重要的学术价值和应用价值． 关键词。禽传染性支气管炎病毒Sl基因毕赤酵母分泌表达 researchofAvainInfectiousBronchitisvirusSl inP／ch／aPastoris Expression gene ·YUZu．hun。WANG DINGKel Hong．Nmg．2‘3 ofAnimalScienceand ofLifeSciences．Rese．m曲 University，Yaall625014，China；3．School Technology,SichuanAgricultural Disease CentorforAnimalConlmland 610064，China) PreventionBioengineering，SichumUniversity，Cheng}dIl of Almtract：A were tOisolatedmV’SS1 whichwere pairprimersdesignedaccording gonesequences Genbankandthe ofPichia vector acceptedby sequence pastorisexpressionpPIC9K’SMultipleCloning theSI was R．T．PCI乙and廿lenucleotide ofSl was Site0ViCS)．Thengcne amplifiedby sequencelength gene 1 andthe acid l deducedamino iS52 the includedcodonin3’ 566bp sequencelength aa,andsequence stop terminalbutdidn’tinclude in5’terminal．111eS1 was SnaBIandNotI． signalpeptide fiagmentdigestedby 也en withthe also secreted vector