JNK磷酸化14-3-3在大鼠缺血性脑损伤中的作用.pdfVIP

654 TianjinMedJ，July2014，Vo1．42No．7 JNK磷酸化14—3—3在大鼠缺血性脑损伤中的作用 王晓天 刘晓梅 汤仁仙 尤红娟 李小翠 秦苏萍 宋远见 摘【要】 目的 探讨c—Jun氨基末端激酶(JNK)磷酸化14—3—3在大鼠缺血性脑损伤中的作用。方法 20只大 鼠均分为4组 ：假手术组、缺血复灌组、SP600125组和溶剂对照组。制作大鼠全脑缺血模型，应用免疫沉淀和免疫印 迹法检测4组大鼠脑缺血复灌 12h海马CA1区神经元 14—3—3磷酸化(p-14-3-3)、14—3—3与Bax结合 、Bax在胞浆和 线粒体的蛋白表达情况。结果 与假手术组相比，缺血复灌组、溶剂对照组及SP600125组胞浆中的p一14—3—3蛋白、 线粒体中的Bax蛋白均增高，14—3—3与Bax的结合降低 ，SP600125组的胞浆p一14—3—3蛋白、线粒体Bax蛋白低于缺 血复灌组和溶剂对照组 ，14—3—3与Bax的结合高于缺血复灌组和溶剂对照组(均PO．05)。结论 JNK磷酸化14—3— 3在大鼠缺血性脑损伤中发挥了重要作用。 【关键词】 14—3～3蛋白质类；JNK丝裂原活化蛋白激酶类；bcl一2相关x蛋白质；脑缺血 【中图分类号】R743．31 【文献标志码】A D【OI】 10．3969~．issn．0253—9896．2014．07．008 TheEffectsof14—3—3PhosphorylationInducedbyJNKonIschemicBrainInjuryinRats WANGXiaotian，LIUXiaomei，TANGRenxian，YOUHon~uan，LIXiaocui，QINSuping，SONGYuanjian DepartmentofPathogenicBiologyandImmunology,XuzhouMedicalCollege，Xuzhou221002，China [Abstract】 Objective Toinvestigatetheeffectsof14—3—3phosphorylation(p-14—3—3)inducedbyC—JunN—termi— nalkinase(JNK)onischemicbraininjuryinrats．Methods Twentyratsweredividedinto4groups：shamoperationgroup， ischemia-reperfusiongroup，SP600125groupandsolventcontrolgroup．Theratmodelofcerebralischemiawasestablished． TheP一14-3-3．thebindingof14—3—3andBaxandtheproteinexpressionofBaxincytoplasm andmitochondriainhippo— campalCA1regionweredetectedbyimmunoprecipitation(IP)andimmunoblotting12一hourafterischemia—reperfusionin fourgroups．Results Comparedwiththesham operationgroup．proteinexpressionlevelsofP一14～3—3incytoplasm and Baxinmitochondriaweresignificantlyincreased．thebindingof14—3—3andBaxwassignificantlydecreasedinischemia—re— perfusionrgoup，solventcontrolgroupandSP600125group．Theproteinexpressionsofp-14—3—3andBaxweresignificantly lowerinSP600125groupthanthoseofischemia—reperfusiongroupandsolventcontrolgroup．Theb