高效液相色谱分离制备10种有机磷农药.pdfVIP

1 高效液相色谱分离制备10种有机磷农药 徐恒振 宣秋江 周传光 姚子伟 国家海洋环境监测中心，辽宁大连 116023 hzxu@ 摘要：建立了高效液相色谱-紫外检测器（HPLC-UVD）分离/制备 10 种有机磷农药（OPPs） 的技术方法。通过对 HPLC-UVD 分离 10 种 OPPs 色谱条件的优化研究，结果表明，以不同比 例的甲醇-水作为流动相、流速为 0.4mL/min、波长为 225nm 的梯度洗脱条件下，HPLC-UVD 可分离制备 6 个馏分的单体 OPP 化合物和 2 个馏分的二组分 OPPs 混合物，其最小制备浓度 在 0.19ng/mL～1.55ng/mL之间。 关键词：高效液相色谱, 紫外检测器，分离，制备, 有机磷农药。 中图分类号：O657.7 1.引言 有机磷农药（OPPs ）是目前我国使用量最大的农药，大多数OPPs 具有高毒性或中等 毒性，如对硫磷、甲拌磷、敌敌畏、乐果、敌百虫等。OPPs 残留问题已被广泛关注，各国 大都制定了相关法规，其限量标准越来越低。测定 OPPs 的常用方法有：薄层色谱法[1，2] ， 气相色谱法[3-5]，气相色谱/质谱联用[6,7]等。高效液相色谱-紫外检测器（HPLC-VUD ）分离 测定 OPPs，以其不破坏 OPPs 的特点，可被用于制备OPPs 标准物质。但由于高效液相色谱 法一般只能同时分离测定 3 种 OPPs[8-10]，从制备 OPPs 标准物质的角度出发，难以将这些方 法应用到 OPPs 标准物质的分离制备中。对此，本文建立一个 HPLC-UVD 分离制备 10 种 OPPs 的技术方法，为制备OPPs 的标准物质提供技术支撑。 2.材料和方法 2.1 实验仪器 HITACHI-7100高效液相色谱仪，配带紫外检测器（HITACHI L-7420）；spherisorb ODS2 色谱柱（150mm×4.6mm×3μm）；微量注射针（50μL）；氮吹仪（Organomation Associates Inc.USA）。 2.2 试剂与处理 正己烷：色谱纯；甲醇：色谱纯（天津科密欧）；亚沸蒸馏水：在全石英亚沸水蒸馏器 中，依次加入5g高锰酸钾、3L 自来水和50mL H SO ，混匀，在水温未达到沸点的温度（变 2 4 阻器电压小于70V下加热）下缓慢蒸馏，收集而得 10种OPPs标准储存溶液（浓度皆为100μg/mL ）：速灭磷、水胺硫磷、杀扑磷、甲基对 硫磷、马拉硫磷、杀螟松、对硫磷、异稻瘟净、甲拌磷、二嗪农，纯度＞99.0 ％（国家农药 1 国家高技术研究发展计划（863 计划）资助项目：典型海洋有毒有机污染物标准物质制备技术(课题编号： 2006AA09Z164 ）. 1 质检中心，沈阳) 。 10种OPPs混合标准使用液（浓度皆为10μg/mL ）：系由10种OPPs标准储存溶液用甲醇 配制而成，现用现配，冰箱中4 ℃下冷冻保存，保存期为1周。 3.结果与讨论 3.1 等梯度洗脱 实验用的流动相由甲醇和水组成，表 1 为不同等梯度程序的液相色谱条件。图 1 至图 7 为不同甲醇含量的等梯度洗脱的HPLC-UVD 谱图（进样量皆为10μL ，进样浓度为 10μg/mL ）。 表 1 不同等梯度程序的液相色谱条件 Tab.1 The chromatographic conditions of different constant gradient programs 程序号 甲醇含量（﹪）