医学资料-13-核算的生物合成.pptVIP

第十三章 核酸的生物合成 导 学 掌握遗传信息传递的中心法则，复制和转录的基本过程。 熟悉半保留复制、逆转录、DNA突变、点突变和切除修复概念。 了解半保留复制的实验依据；真核生物DNA复制的特点；端粒和端粒酶；DNA重组修复和SDS修复；转录后加工。 教学内容 第一节 概 述 基因(gene) 核酸分子中贮存遗传信息的遗传单位，是指贮存有功能的蛋白质多肽链或RNA序列信息及表达这些信息所必需的全部核苷酸序列。 基因组（genome）细胞或生物体中一套完整单倍体的遗传物质的总和 。 一、遗传信息传递的中心法则 翻译（translation） 由mRNA中的核苷酸序列所组成的遗传密码决定蛋白质中的氨基酸排列顺序。 二、 半保留复制 　新形成的子代分子中的一条链来自亲代DNA保留下来的，另一条链是新合成的，这样生成的子代DNA分子与亲代DNA分子的碱基排列顺序完全相同，像一个复制品，因此这种复制方式被称为半保留复制。 三、半保留复制的实验依据 哈佛大学生物系教授Mathew Ｍeselson和他的学生Franklin Stahl通过实验对半保留复制进行验证，实验结果于1958年发表。 半保留复制的意义 保证了DNA在传代中的稳定性，经过许多代的复制，DNA多核苷酸链仍可完整地存在于后代而不被分解掉，体现了DNA的遗传的保守性。 遗传的保守性,是物种稳定的分子基础,但不是绝对的。 参与DNA复制的物质 底物(substrate): dATP, dGTP, dCTP, dTTP 聚合酶(polymerase): 依赖DNA的DNA聚合酶 模板(template) : 解开成单链的DNA母链 引物(primer): 提供3?-OH末端使dNTP可以依次聚合 其他的酶和蛋白质因子 复制的化学反应 　　(dNMP)n + dNTP → (dNMP)n+1 + Ppi 一、 参与DNA复制的主要酶类 解旋、解链酶类 　　 DNA拓扑异构酶（DNA topoisomerase） 　　 DNA解链酶（DNA helicase） 　　 单链DNA结合蛋白（single stranded DNA 　　　　　　　　　　　　　　　　　binding protein, SSB） 引物酶 （primase） DNA聚合酶 (DNA　polymerase，DNA pol ) DNA连接酶(DNA ligase) （一）解旋、解链酶类 DNA分子的碱基埋在双螺旋内部，只有把DNA解成单链，它才能起模板作用。 多种酶和辅助蛋白质因子的协同作用，共同解开、理顺DNA双链，并维持DNA分子在一段时间内处于单链状态。 DNA拓扑异构酶（DNA topoisomerase） 拓扑异构酶作用特点 　　　　　既能水解 、又能连接磷酸二酯键 分类 　　　　　　拓扑异构酶Ⅰ 　　　　　　拓扑异构酶Ⅱ 作用机制 ： 拓扑异构酶Ⅰ 　　　切断DNA双链中一股链，使DNA解链旋转不致打结；适当时候封闭切口，DNA变为松弛状态。反应不需ATP。 拓扑异构酶Ⅱ 　　　切断DNA分子两股链，断端通过切口旋转使超螺旋松弛。利用ATP供能，连接断端， DNA分子进入负超螺旋状态。 DNA解链酶（DNA helicase） 复制前，DNA超螺旋结构被拓扑异构酶松弛后，还需要解链酶在ori部位解开双链碱基对之间的氢键形成两股单链， 解链过程需要DnaA、 DnaB、DnaC等多种解链蛋白参与。 解链酶即为DnaB蛋白。 单链DNA结合蛋白（single stranded DNA binding protein, SSB） 在复制中维持模板处于单链状态并保护单链的完整 在复制中SSB不是沿着复制方向移动，而是不断脱离，又不断与新解开的单链结合。 （二）引物酶（primase） 复制起始时催化生成RNA引物的酶 引物酶由dnaG基因编码，故引物酶又称DnaG蛋白。 在 DnaB 、DnaC 等蛋白因子参与下辨认并结合于复制起始点上，进而结合引物酶形成引发体（primosome）。 （三）DNA聚合酶 (DNA polymerase,DNA pol ) 全称：依赖DNA的DNA聚合酶 (DNA-dependent DNA polymerase) 简称：DNA-pol 活性： 1. 5??3? 的聚合活性 2. 核酸外切酶活性： 3? ? 5?外切酶活性 5? ? 3?外切酶活性 原核生物的DNA聚合酶