GPS2的表达纯化以及抗体的产生.pdfVIP

国际生物医学 Il程杂志 2012年 6月第 35卷第 3期 IntJBiomedEng，June2012，~o1．35，No．3 · 173 · · 论 著 · GPS2的表达纯化以及抗体的产生 蒋丽琴 李学敏 刘玲蓉 熊青青 张其清 【摘要】 目的 旨在克隆表达纯化GPS2蛋白，并制备抗血清用于研究GPS2的功能。方法 用RT— PCR得到GPS2基因，并克隆到pET一28a原核表达载体 ，用 Ni2+-NTA树脂纯化GPS2后 ，免疫兔得到抗血 清。结果 成功构建了pET一28a—GPS2原核表达质粒 ，并实现重组蛋白在大肠杆菌中的高效表达，M “一NTA 树脂亲和层析纯化了GPS2蛋白，经过透析复性后得到质量浓度约为300I~gm／l的GPS2纯化蛋白；制备了 GPS2蛋白的特异性多克隆抗血清，ELISA测定抗血清效价远远高于 1：12800，WesternBlot表明该抗血清 能够特异性识别结合 GPS2蛋白。结论 GPS2在E．coli高效表达，其纯化产物可用于制备抗血清，用于 GPS2的功能分析。 关【键词】GSP2；