动物细胞灌注培养系统流程及其应用.pdfVIP

动物医学进展 ，2014，35(4)：125—128 ProgressinVeterinaryM edicine 动物细胞灌注培养系统流程及其应用 颜 旭 ，顾承真 ，张志强 ，洪厚胜 (1．南京工业大学生物与制药工程学院，江苏南京 211816；2．南京汇科生物工程设备有限公司，江苏南京 21ooo9) 摘 要：近年来，动物细胞培养技术在生物制药领域成为最受关注的热点之一 ，灌注培养技术广泛应用 于动物细胞高密度培养 ，推动 了现代生物医药产业的发展。通过对动物细胞代谢分析引出灌注培养优势特 点，再介绍常规灌注培养系统组成结构，对其核心装置细胞培养罐和截留装置进行综述。其 中重点分析了适 用于动物细胞悬浮培养灌注系统的流程原理及灌注速率控制方法 ，ElephantEar桨的性能研究以及旋转过 滤器的结构设计 。总结近年来国内外文献关于灌注培养在组织工程、疫苗和单克隆抗体方面的应用。最后 指 出研究灌注系统存在的难点，展望 了灌注培养系统的应用前景。 关键词：动物细胞；灌注系统；灌注培养；应用 中图分类号：Q813．11 文献标识码 ：A 文章编号：1007—5038(2014)04—0125—04 动物细胞培养技术已被广泛应用于生物医药产 UDP氨基已糖积累，进而对细胞生长中蛋 白质糖基 品的工业生产 中 。，如蛋 白质药物研发、干细胞移 化过程造成影响，同样会改变某微环境 的pH，限制 植 、疫苗生产 、人造组织器官等各个领域 ，成为生物 培养基中谷氨酰胺浓度可缓解氨 的产生 。乳酸和氨 制药领域最重要 的关键技术之一 ，并 以其研究的深 对细胞生长、生产率和代谢 的影响早有相关的研究 入和进展推动了生物技术产业 的迅速发展_l4]。灌 报告_7_8_。所 以对于动物细胞反应器 ，为了避免葡萄 注培养方式是提高动物细胞密度 的有效方法 ，灌注 糖和谷胺酰胺在代谢过程 中产生 的副作用 ，必须要 培养可以为细胞连续补加新鲜培养液和及时排出有 配有高效率的灌注系统，一边把代谢废物 (乳酸和 毒的代谢产物，提供更有利于细胞生产 的培养环境 。 氨)排出反应器，一边把新鲜营养成份补充进来。 灌注培养系统是多元化 的，不 同动物细胞适应不 同 灌注培养有以下优势：①增加得率：灌注培养在 的细胞培养反应器和截 留装置 ，国内外多家企业致 连续注入新鲜培养基同时，连续等量排 出含代谢负 力于动物 细胞反应器 的研 究开发 ，如美 国 NBS公 产物的废液 ，细胞一直在最适营养环境下生产 ，保持 司，德 国Sartoriusstedim 公司，上海 El泰医药设备 高的活力 ，实现高密度培养，细胞得率大大增加 。② 公司等等 。灌注培养系统流程需要稳定 的控制系 保持稳定的培养环境 ：灌注培养把乳酸和氨等负代 统 ，近几年改进 了很多细胞培养在线检测装置 ，如在 谢产物排出，营养物充足均匀 ，细胞在这种稳定适宜 线流动注射仪和葡萄糖浓度电极 的应用优化了灌注 的溶氧、pH、温度环境下可持续增殖 。③灌注培养 培养的补料过程 ，目前灌注培养系统在细胞高密度 检测废液中葡萄糖和乳酸浓度 ，进而更清楚当前细 培养应用广泛。 胞培养微环境情况 ，并调节灌注速率适时提供营养。 1 灌注培养的优势 在培养箱里随着培养液的流动代谢产物和旁分泌因 素不断地被消除_lg]。④灌注培养系统可以提供 2个 细胞生长的主要能源物质和碳源物质是葡萄糖 独立的液体通道，从而得到双面梯度培养效果使细 和谷氨酰胺 ，这两者在代谢过程 中会产生负代谢产 胞实现更好的分化n