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摘 要
布鲁菌病是由布鲁菌引起的人、畜共患传染病。在内蒙古地区流行较久，危
害严重。本试验采集流产牛、羊胎儿的病料和布鲁菌病血清学检测阳性奶牛的牛
乳进行病原分离与鉴定。经过分离培养、涂片、生化试验以及玻片凝集试验，共
分离出布鲁菌4株。采用CO。需求、H：S产生、染料抑制、单因子血清、噬菌体
裂解等试验对这4株菌进行了种型鉴定。鉴定结果发现4株菌中有3株为羊种生
物3型，1株为牛种生物3型。为了弥补血清学和微生物学方法检测和诊断布鲁
菌病的种种不足，本研究同时根据GeneBank上公开发表的布鲁菌外膜蛋白OMP25
基因序列设计引物，用PCR方法对分离出的这两种型的布鲁菌和标准株分别扩
增，提取OMP25基因并与T载体连接进行克隆。序列分析表明成功的克隆到目的
基因，分离出的3株羊种菌之间同源性为100％，与Brucellamelitensis的同源性
为99．8％。牛种分离菌与Brucellaabortus的同源性为99．5％。该基因的克隆对布
鲁菌病的检疫及快速诊断具有十分重要的意义。
关键词：布鲁菌：分离培养；种型鉴定；OMP25；克隆
ofBrucellaand of
IsolationandIdentification Cloning
OMP25Gene
Abstract
akindofinfectiousdiseases
The Brucella，is
Brucellosis，causedby
been
bothhuman and has
contracted livestock，which
commonlyby beings
fora timeinInner ofabortedfetus
widespreadlong Mongolia．Thesamples
and as milkof cattlewhosebrucellosis testwas
lambwellas dairy serological
identificationof
werecollectedto ontheisolationand
positive carry
slide
testsand
pathogen．Afterseparation，smear，biochemLcal
that3strainsofisolates
Brucellastrainswere andidentified
test．4 separated
l strainwasthe 3of
wereBrucellamelitensisbiovar3andtheother
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