宫颈癌细胞中HMAT1基因的功能预测及其干扰小RNA的筛选.pdfVIP

肿瘤 2005 年 3 月 25 日第 25 卷第 2 期 Tumor Mar . 2005 , Vol . 25 , No . 2 113 基础研究 宫颈癌细胞中 HMAT1 基因的功能预测及其干扰小 RNA 的筛选 欧 　璇 　赵 　 　左泽华 　李 　辉 　魏 　芸 　伍欣星 ( ) 摘要 : 目的　预测宫颈癌细胞中人类与鼠同源乳腺转化基因 HMA TI 的功能及筛选出能有效沉默该基因的干扰小 RN A 。方 法 　采用细胞原癌基 因、抑癌基 因分类芯片对原发性宫颈癌标本进行筛选 , 通过生物信息学分析 HMA T1 基 因 , 针对 HMA T1 基因设计了三条特异性干扰小 RNA ,分别与 p RN AU 6 . 1Hygro 重组后 ,与含有该基因的重组体瞬时共转染 B 16 F0 ( ) 细胞 ,用逆转录聚合酶链反应 R TPCR 技术检测对 HMA T1 基因的干扰效果 。结果 　细胞原癌基因、抑癌基因分类芯片筛 选出表达量明显上调的基因共四条 。对其中上调明显的 HMA T1 基因 ,通过生物信息学预测其为一个调节细胞生长的看家 基因 ,其编码的蛋白质为一个 Ⅰ型跨膜蛋白,且其酪氨酸蛋白激酶 Ⅱ磷酸化位点可能与 HMA T1 蛋白功能活化有关 。半定量 ( ) 检测结果表明其中第一条特异性干扰小 RN A 有显著性抑制效果 P 0 . 05 。结论 　初步预测 HMA T1 基因很可能是与宫 颈癌相关的癌基因 ,其编码的蛋白质可能参与细胞的信号转导 ,设计出针对该基因的干扰小 RNA 可以有效沉默 HMAT 1 基因。 关键词 :宫颈肿瘤 ; 　寡核苷类排列序列分析 ; 　HMA TI 基因; 　RN A 干扰 中图分类号 :R737 . 33 ; R730 . 23 1 + . 3 　　文献标识码 :A 　　文章编号 : 1000743 1 (2005) 020 11305 O U X uan , The f unctional prediction of HMAT1 gene in cervical carcinoma cells and the silencing effect of its si RNA 　 ( 　Z H A O M i n , 　Z UO Zeh ua , 　L I H ui , 　W E I Yun , 　W U X i nx i ng . 　 D ep a rt ment of M olecul ar B iology , I ns t i t u ) te of V i rology , M e d ical S chool of W uhan Uni vers i ty , W uhan , H ubei 　43007 1 , Chi na Abstract : Objective 　To p redict t