基于镧离子增敏效应的四环素残留检测方法.pdfVIP

江苏农业科学 2014年第42卷第7期 贺 江，杨 恋，杨品红．基于镧离子增敏效应的四环索残留检测方法[J]．江苏农业科学，2014，42(7)：299—301 基于镧离子增敏效应的四环素残留检测方法 贺 江，杨 恋，杨品红 (湖南文理学院生命科学学院／湖南省水产健康养殖与加工重点实验室，湖南常德415000) 摘要：依据稀土离子 La3能够增强四环索紫外吸收强度的原理，建立一种四环素残留快速检测方法。水产品中 的四环素残留用 EDTA—MeIlvaine缓冲液提取，提取液用 HLB固相萃取小柱净化；甲醇洗脱液氮吹浓缩至干后的残 渣用 1mL混合溶液( +溶液： 一Hc】缓冲藩蕞： =1：1：8)溶解，摇匀，于室温下静止反应30rain，最后将样液置于微 量比色皿中在390hill处测定吸光度，并换算出抗生素残留浓度。结果表明，所建立的方法具有较好的灵敏度、准确度 和精密度，可在水产养殖地或超市等现场推广应用。 关键词：稀土元素；紫外吸收；四环素；抗生素残留；快速测定；水产品 中图分类号：1$201．6 文献标志码：A 文章编号：1002—1302(2014)07—0299—02 水产养殖业近年来在我国发展迅速，但抗生素残留问题 1．3．1，1 四环素标准母液 精确称取2mg四环素，加水完 是影响水产养殖业健康发展的瓶颈因素之一…。建立有效 全溶解 ，定容至 100rIlL，配制成2O e,／mL四环素母液，置于 的残留检测技术体系是对抗生素残留问题进行有效控制的前 冰箱保存备用。 提与基础。现有的抗生素残留检测方法主要有2类 ：一类是 1．3．1．2 EDTA—Mcllvaine缓冲溶液 称取一定量的 基于HPLC等精密仪器的标准检测方法 ，但这类方法所 No~EDTA、~ ItPO4和柠檬酸，分别配制成0．1、0．2．0．4rr~l／L 用的仪器设备价格昂贵，也不便于现场操作；另一类是基于微 的溶液。按照3：2的体积比混合 N~HPO 和柠檬酸，配制 生物抑制 。或酶联免疫反应 的‘简便方法，但是微生物抑 成McIlvaine缓冲液。将 0．1mol／LEDTA溶液与 McIlvaine 制法耗时较长，酶联免疫检测法的关键试剂 (抗体)制备较困 缓冲液按照1：1的体积比混合，配制成 EDTA—McIlvaine缓 难。因此，建立简便有效的抗生素残留检测方法成为一项被 冲溶液(混合后pH值约为4)。 广泛关注且具有较大现实意义和应用价值的研究工作 。 1．3．1．3 工a”溶液 称取0．163gh2O，，溶于少量浓 HCl 因此 ，本研究选取水产养殖中较常用的四环素为对象，依据稀 中，小心蒸发近干，加水定容至 100mL，配制成 10mmol／L储 土元素能够增强四环素紫外吸收强度的原理 J，结合对鱼肉 备液，保存于冰箱，使用时稀释至 1rmnol／L。 组织样品前处理方案的探讨，建立一种简便有效、可在现场进 1．3．1．4 Tris—HCI缓冲溶液 将50mL0．1mol／LTris溶 行操作的四环素残留检测方法。 液和38．5mL0．1mol／LHC1溶液混合，定容至 100mL，此时 pH值约为7．6。 1 材料与方法 1．3．2 稀土离子La”对四环素紫外吸收特性的影响 取2 1．1 材料与试剂 份 1mL四环素母液分别加入到25mL容量瓶中，其中一份依 新鲜的鲫鱼(经标准检测方法测定无四环素残留)，购 自 次加入2．5mL1mmol／LLa”溶液和2．5mLTris—ttCI缓冲 湖南省常德市某农贸市场；四环素标准品，购 自德国Dr公司； 溶液，再加水定容；另一份则加入2．5mLTris～HC1缓冲溶 99％La：O，，购 自江西省赣州市科明锐有色金属材料有限公 液，再加水定容；室温静置 3