心力衰竭家兔心肌肌浆网钙回摄功能的异常及其影响因素.pdfVIP

生理学报Acta iologicaSinica，August25，2014，66(4)：483_488 DOI：10．13294~．aps．2014．0057 http：／w／ww．actaps．corn．cn 心力衰竭家兔心肌肌浆网钙回摄功能的异常及其影响因素 王 蕾 ，张世杰 ’，李莉 ，兰超 ，张瑞 ，刘志华 郑州大学第一附属医院急诊科；。检验科，郑州450052；苏州大学附属第一医院心内科，苏州215006 摘 要：本文旨在探讨心力衰竭家兔心肌肌浆网钙回摄功能的异常及其影响因素和可能的机制。用主动脉破瓣术加腹主动脉 缩窄术造心衰模型，用钙离子荧光成像仪检测心肌肌浆网钙回摄功能，用无机磷酸根法测定心肌肌浆网钙泵的活性，用 Westernblot检测各组心肌组织中肌浆网钙泵(SERCA2a)、受磷蛋~t(PLB)、16位丝氨酸磷酸化．受磷蛋~(PLB．Ser)、17位苏 氨酸磷酸化一受磷蛋f~t(PLB-Thr”)、Ca．钙／调素依赖的蛋白激酶II(CaMKII)、蛋白激酶A (PKA)和蛋白磷脂酶(PP1a)的蛋白表 达，用y-P底物掺入法测定CaMKII、PKA的活性。结果显示，与假手术组相比，心衰组钙回摄量显著下降 0．01)，SERCA2a 在心肌中的表达量和活性均显著下降(P0．05)，PLB的表达水平及其磷酸化位点(Set、Thr)的磷酸化状态明显降低(P 0．05)，且PKA和CaMKII的表达及活性均明显升高(尸0．05或P0．01)，PPla的表达量显著升高 0．05)。以上结果证实心 衰家兔模型心肌肌浆网钙回摄功能的异常与SERCA2a的表达活性、PLB及其磷酸化水平均显著下降有关，提示PLB的两个磷 酸化位点(Ser、Thr”)可能共同参与心衰家兔心肌肌浆网钙泵活性的调节。 关键词：心力衰竭；钙回摄；肌浆网：受磷蛋白 中图分类号：R541 Abnormalcalcium re—uptakein myocardium sarcoplasmicreticulum in rabbits withheartfailureandtheinfluencingfactors WANGLei，ZHANG Shi．Jie’，LILi，LAN Chao，ZHANGRui。LIU Zhi．Hua ， DepartmentofEmergency；2DepartmentofClinicalLaboratory,theF{rstAffiliatedHospitalofZhengzhouUniversity,Zhengzhou 450052,China；3DepartmentofCardiology,theFirstAffiliatedHospitalofSoochowUniversity,Suzhou21500~China Abstract：Theaim ofthepresentstudywastoinvestigatetheabnormalcalcium re．uptakefunctionofmyocardium sarcoplasmicretie— ulum fSR)inrabbitswithheartfailure，aswellaspotentia1mechanisms．Heartfailuremodelwasestablishedinrabbitsthroughaortic insufficiencyandconstrictionofabdominalaorta．TheSR Ca2re．uptakefunctionwasmeasuredwithacalcium imagingdevice．The activityofmyocardiumSRcalciumadenodinetriphosphatase2a(SERCA2a)wasmeasuredbyinorganicphosphate．Theprotein expressionsofSERCA2a，CaMKⅡ，PKA，PPla，phospholamban(PLB)，PLB—SerandPLB—ThrwereevaluatedbyWestem blot． TheactivitiesofPKA nadCaMKI1weredetectedbyy_32psubstrateincor0oration ． Theresultsshowedthat．co