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悬浮培养昆虫细胞SF9瞬时表达重组蛋白的条件优化.pdf
药 物 生 物 技 术
PharmaceuticalBiotechnology 2014,21(4):321—324 321
TransientExpression ofRecombinantProteinsin InsectCellsSf9
YUANFeng—mei,GUOXin—yong ,WANG Cai—kun ,LUJia。,XIEQiu—ling
(.SchoolofLifeScienceandTechnology,。,n0 University,Guangzhou510632,China;2.GuangdongProvincial
KeyLaboratoryofBioengineeringMedicine,Guangzhou510632,China;3.NationalEngineeringResearchCenterof
GeneticMedicine,Guangzhou510632,China)
Abstract TransientGeneExpression(TGE)isafastapproachforrp‘roteinproductionintheabsenceofselectionof
high·expressioncellline.Therearefew reportsaboutTGE ininsectcellalthoughinsectcelllineSF9isawidelyusedin
geneexpressionsystem.Inthisstudy,thefactorsinfluencingtransfeetionefficiency,includingamountofDNA,ratioofDNA
andPEI,andcelldensitywereoptimizedtoexpresseGFPandTNFR—FcininsectcellSf9insuspension
. Undertheopti.
mizedconditions,37% ofthetransfectionefficiencyand700LL LrecombinantTNFR—Fcwereobtained.
Keywords Insectcel1,Transientgeneexpression,PlasmidDNA,Polyethyleneimine,Transfection,eGFP. TNFR—Fc
CLCNumber Q785 Documentcode A ArticleID 1005.8915f2014)04—0321—04
methodwereofund[11-14]
. AnditisstillblankinChina.
Inthisstudy,eGFPandTNFR-Fc(humantumornecrosis
Twomethodsareusuallyusedofrproduction ofrecombi— factorreceptor—Fcfusionprotein)wereusedasheterologous
proteinstooptimizeanewkindofp0lyethylenimine-basedDNA
nantprotein in mammalian cells:Transie
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