2第七章细菌和噬菌体的遗传分析.pptVIP

* * 第三节. 噬菌体的遗传分析 1. 病毒概述 2. 噬菌体的繁殖和感染周期(infection cycle) (1). 烈性噬菌体 (2). 温和性噬菌体 3. 噬菌体的突变型 4. 噬菌体的基因重组 5. 转导与作图 (1). 普遍性转导 (2). 局限性转导 病毒无细胞结构，仅由蛋白质和核酸构成,可以分为: (1). 动物病毒 (2). 植物病毒 (3). 细菌病毒（噬菌体, bacteriophage, phage） T噬菌体的结构 蛋白质外壳 核酸 1. 病毒概述 2. 噬菌体的繁殖和感染周期 (1). 烈性噬菌体: 如T噬菌体 吸附 细菌裂解,释放出子代噬菌体颗粒 细菌染色体降解 噬菌体DNA和蛋白质外壳包装成 子代噬菌体颗粒 (2). 温和噬菌体: 吸附 溶菌周期 - uv诱导 细菌裂解 溶源周期 如?噬菌体: 原噬菌体 3. 噬菌体的突变型 1). 条件致死突变型: (1). 温度敏感突变 (2). 抑制因子敏感突变 2).宿主范围突变型: E.coli B E.coli B/2 E.coli B+E.coli B/2 h+ + - 半透明噬菌斑 h- + + 透明噬菌斑 3).噬菌斑形态突变型: (1). r+ 小噬菌斑,边缘模糊: 2个以上噬菌体同时侵袭时,出现溶菌阻碍现象(lysis inhibition). (2). r- 大噬菌斑,边缘清晰: 快速溶菌(rapid lysis),无溶菌阻碍现象(lysis inhibition) 4. 噬菌体的基因重组 用T2噬菌体h-r+和h+r-混合感染E.coli B,再用释放出来的子代噬菌体感染E.coli B+E.coli B/2 ,出现四种噬菌斑: 透明小噬菌斑(h-r+ ) 半透明大噬菌斑(h+r-) 透明大噬菌斑(h-r-) 半透明小噬菌斑(h+r+) T2噬菌体的四种噬菌斑 重组率= (h+r++h-r-) 总噬菌斑数 5. 转导与作图 转导(transduction):以噬菌体为媒介,将细菌的染色体片段或基因从一个细菌转移到另一个细菌. 供体A 受体B (1). 普遍性转导 (2). 局限性转导 噬菌体 (1). 普遍性转导 普遍性转导(generalized transduction):噬菌体携带供体染色体片段是完全随机的, 供体染色体中所有基因具有同等机会被转导入受体,而且各个标记基因被转移的频率大致相等.这是因为噬菌体将供体染色体降解，在合成自身DNA和包装时，偶尔会将细菌染色体片段包装进入子代噬菌体颗粒，并带入受体菌。 如用P22噬菌体转导沙门氏菌: 供体A: trp+phe+tyr+ 受体B: trp- phe- tyr- 可出现大致相等的重组子: trp+phe-tyr- trp-phe+tyr- trp-phe-tyr+ 普遍性转导的频率较低,约为10-5,两个基因同时转导的频率则更低, 仅有10-5 ?10-5=10-10. 如果两个基因同时转导的频率则较高,则说明它们相互连锁,成为共转导(cotransduction).共转导的频率越高,则基因连锁越紧密.反之则基因距离越远.据此可用于细菌染色体的基因作图. (2). 局限性转导(restricted transduction) 又叫特异性转导(specialized transduction),这类噬菌体只能转移细菌染色体的特定部分和基因. 如?噬菌体是一种附加体(episome), 即可作为一个复制因子独立存在，又可以整合到细菌染色体上的特定位点——attB位点,而形成原噬菌体。 attB位点一边是gal基因，另一边是bio。在紫外线诱导下，原噬菌体从细菌染色体上离开时，偶尔带有宿主细菌基因，包装形成局限性转导的噬菌体颗粒，可将供体基因转移至受体细菌，但仅限于 靠近attB位点附近的基因，如?噬菌体专门转导gal和bio基因。 *