围手术期检测肝细胞癌病人外周血AFPmRNA和MAGE-1mRNA的临床意义.pdf

第三军医大学硕士研究生论文 围手术期检测肝细胞癌病人外周血AFPmRNA 和MAGE-1mRNA的临床意义+ 摘 要 目的：近年来，具有高敏感性的RT—PCR已经被用于实体瘤微转移的检测。甲胎蛋 白和白蛋白mRNA是肝细胞癌微转移检测常见的标志物。然而，由于正常肝细胞也可表 达甲胎蛋白和白蛋白mRNA，故对于其在微转移检测中的意义存在争议。另外，由于肿 瘤细胞存在基因异质性，原发灶和转移灶的基因表达可能不一致，因此单标志物检测 微转移容易出现假阴性。鉴于以上肝细胞癌微转移检测中存在的问题，我们推测：采 用多标志物联合检测可能有助于提高微转移检测的敏感性和特异性。 本研究在围手术期联合检测了肝细胞癌病人外周血中肝细胞特异性的AFPmRNA和 性及AFPⅢRNA和MAGE-lmRNA在围手术期的变化与术后转移复发的关系。 方法：研究对象分为四组病例及健康志愿者：A组，组织学证实的肝细胞癌59例； B组，肝炎和肝硬化22例；C组，肝转移癌8例；D组，肝血管瘤8例；E组，健康志 愿者20例。围手术期外周血(5m1)采集分别在术前、术后7天、术后28天进行。通 过巢式RT—PCR技术检测外周血中AFPmRNA和NAGE-tmRNA的表达。 结果： 1．系列稀释实验 少可检出10个肝癌细胞(HepG2)。 2．术前外周血微转移检测 2．1 AFPmRNA检测 的检出率和TNM分期相关。另外，当肝癌直径大于5cm、多结节、伴门静脉癌栓、CD44v6 表达阳性时，AFPmRNA的检出率明显提高。而血浆甲胎蛋白水平、肝癌分化程度、肝 13．7％(3／22)；其余c、D、E组均未检出AFPmRNA。 ‘本项目受雷家自然科学基金资助，批准号 Ⅵ 第三军医大学硕士研究生论文 2．2 MAGE—lmRNA检测 E组均无MAGE．1mRNA检出。 2．3 AFPmRNA和M_AGE．1mR．NA表达的关系 MAGE．1mRNA的检出显著相关(P0．05)，相关系数为O．307。 3。术后微转移的检测 3．1AFPmRNA的检测 组)；5例病人术后一周检测呈阳性或阴性，但术后28天检测均呈阴性(C1组)：其余 23例病人术前和术后检测均呈阴性(D1组)。 术前外周血AFPmRNA的检出和术后转移复发无明显相关性(P0．05)。 差异但和Dl组有显著差异(P0，01)。 3．2MAGE．1mRNA检测 例围手术期检测均为阴性(D2组)。 术前MAGE—lmRNA的检出和术后的转移复发无明显相关(P0．05)。 AB2组较c2和D2组更容易在近期内转移复发(P0．05)。 3．3双标志物RT—PCR 物均未检出(III组)。 在I组中，3例病人在术后6月内全部复发；在II组中，7例病人在术后7个月 率与III组有显著差异(P0．05)。 Vn 第三军医大学硕士研究生论文 结 论 癌病人外周血微转移是可行的。联合检测肝细胞特异性的AFPmliNA和癌细胞特异性的 MAGE一1mRNA有助于提高肝细胞癌外周血微转移检测的敏感性和特异性。 2．术前微转移的检出和术后复发无明显相关性。但术后28天AFPmRNA或 MAGE．1mRNA的检出对于术后6月内的转移复发有预警意义，而且联合检测 AFPmRNA和MAGE-lmRNA可以提高预测复发的敏感性和特异性。 关键词：肝细胞癌；AFPmRNA；MAGE．1mRNA；复发； 微转移： 巢式RT．PCR Ⅶl 墨三兰墨查兰堡主堑壅皇兰壅 一 i