KLF5和hhLIM协同激活苯肾上腺素诱导心肌肥大标志基因表达.pdfVIP

中文摘要…………………· 英文摘要………………… 研究论文 第一部分苯肾上腺素诱 表达衣还 —1上．—j—· 刖舌………………………· 材料与方法………… 结果……………………………………………………………………………………………15 附图……………………………………………………………………………………．18 讨{仑……………………………………………………………………………………………30 参考文献…………………………………………………………………32 第二部分细胞间粘附分子1基因K469E多态性与冠心病的关系 前言……………………………………………………………………………………………35刖舌…………………………………………………………………………………………… 材料与方法………………………………………………………………35 结果……………………………………………………………………………………………38 附图………………………………………………………………………．40 附表……………………………………………………………………………………………41 讨{仑……………………………………………………………………………………………42 参考文献…………………………………………………………………·43 综述心肌肥大相关的转录因子研究进展………………………………·46 致谢…………………………………………………………………………………………………．．60 个人简历……………………………………………………………………．．61 中文摘要 达 】丕 摘 要 目的：心肌肥大是高血压、心脏瓣膜病、急性心肌梗塞及先天性心脏 病等负荷性心脏病的并发症，是心肌细胞对多种病理刺激的一种适应性反 应，也是导致顽固性心衰的主要原因。目前，导致心肌肥厚的病理机制尚 不完全清楚。 LIM蛋白是一类富含半胱氨酸且分子结构中具有一个或多个锌指结 构的蛋白质家族，该家族成员广泛参与多种细胞的发育与分化调节及多种 基因的转录调控。hhLIM又称为hLIM3(GenBankAFl21260)，是用三 元递减法从人胎心cDNA文库中筛选克隆的一个与心脏生长发育有关的 新基因，因其编码产物与LIM蛋白家族高度同源且氨基酸序列中含有典 型的LIM结构域而得名。我们以前的研究已经证实，hhLIM是一种浆／核 穿梭蛋白，在分化型细胞中，该蛋白主要分布于胞质中，通过与a-acdn 相互作用，诱导0【．actin纤丝组装形成粗大的肌束结构，维持心肌的收缩 功能。当心肌细胞受肥大因素刺激时，胞浆中的hhLIM进入细胞核内， 的表达。 Krtippel样因子(Krnppel．1ike 因子家族，主要参与调节细胞的发育、分化、增殖和凋亡等过程。KLF 心肌肥大过程中扮演着重要角色。 虽然已经证明hhLIM和KLF5均参与心肌肥大的发生发展过程，但二 者在心肌肥大过程中的相互关系及功能联系尚不清楚。本研究探讨hhLIM 与KLF5在心肌肥大发生发展过程中的相互作用，为揭示心肌肥厚的发生 机制提供新的研究证据。 方法：用胰蛋白酶消化法分离培养大鼠原代心肌细胞；MTT法检测 苯肾上腺素(PE)对细胞增殖的影响；流式细胞分析术分析细胞周期各 时相的分布情况；用Western 中文摘要 钠素(ANF)表达；GST 影响。 结果： 1)PE促进原代心肌细胞肥大 PE(20 h后，心肌细胞体积 pmol／L)作用于原代培养的心肌细胞48 较对照组相比明显增大。RT．PCR和Westernblot结果显示，PE可显著诱 模型复制成功。 2)PE诱导KLF5和hhLIM表达 不同浓度的PE刺激心肌细胞相同时间以及相同浓度的PE作用于细 KLF5和llIlLIM参与PE诱导心肌肥大的发生过程。 3)KLF5与hhLIM协同激活ANF基因的